[发明专利]一种茶籽饼粕的生物脱毒方法

权利要求书

1.一种茶籽饼粕的生物脱毒方法，其特征包括以下几个步骤：

⑴ 制备液体菌种：将德氏乳杆菌1株接种一环斜面菌种细胞于乳酸杆菌液体培养基中，在37~41℃厌氧培养6~12 h，使该种子培养液中菌体浓度分别达到10⁸~10⁹ cfu/mL；将枯草芽孢杆菌1株分别接种一环斜面菌种细胞于液体扩大肉汤营养培养基中，在35~37℃，200 r/min~300 r/min条件下，摇床振荡培养12~24 h，使该种子培养液中菌体浓度分别达到10⁸~10⁹cfu/mL；将1株酵母菌属酵母接种一环斜面菌种细胞于酵母液体培养基中，在30~34℃，150 r/min~250 r/min条件下，摇床振荡培养24~36 h，使该种子培养液中菌体浓度达到10⁸~10⁹cfu/mL，将该三种种子培养液按1:1:1混合即得液体菌种，作为固体菌种的生产菌种；

⑵ 制备固体菌种：按重量百分比取麦麸4.0%~6.0%、葡萄糖1.0%~2.0%、磷酸氢二钾1.0%~1.5%、氯化镁0.2%~0.3%、及茶籽饼粕50%~60%混匀，调节含水重量为35%~40%，制成固体菌种培养基，120~130℃灭菌30~40 min，冷却至35~40℃，按1.0%~1.5%接种重量接入液体菌种，于35~40℃恒温堆积培养4~5天后于45~55℃干燥制得；

⑶ 茶籽饼粕发酵脱毒：按重量百分比取茶籽饼粕70%~80%、麦麸5 %~10%、淀粉1.0%~1.5%、硫酸铵0.3%~0.5%、磷酸氢二钾1.0%~1.5%、及浓度为2000~4000 U/g的酸性纤维素酶0.05%~0.1%混匀，调节含水重量为20%~30%，制成茶籽饼粕脱毒发酵培养基；再将本项权利要求步骤⑵制得的固体菌种以2%~4%的接种重量接种到该茶籽饼粕脱毒发酵培养基中，混合均匀，堆积成高0.7~1.0 m×宽10.0~20.0 m×长20.0~30.0 m的茶籽饼粕堆陇，上面覆盖塑料或稻草，避雨，堆陇中心温度50~70℃下发酵，当发酵7~10天、茶籽饼粕堆陇中心温度达60℃以上时，用人工或机械翻堆一次，当发酵10~15天后，茶籽饼粕堆陇中心温度低于60℃以下时，干燥后即得脱毒茶籽饼粕。

2.根据权利要求1所述的茶籽饼粕的生物脱毒方法，所述步骤⑴中的乳酸杆菌液体培养基为蛋白陈5.0~10.0 g、牛肉膏5.0~10.0 g、酵母粉4.0~6.0 g、葡萄糖10.0~20.0 g、吐温80为 0.5~1.0 mL、磷酸氢二钾1.0~2.0 g、乙酸钠3.0~5.0 g、柠檬酸三铵2.0~5.0 g、氯化镁0.2~0.4 g、硫酸锰0.05 g、蒸馏水1000 mL的比例混匀后，在0.1 MPa压力下灭菌15~20 min，冷却至室温而成。

3.根据权利要求1所述的茶籽饼粕的生物脱毒方法，所述步骤⑴中的液体扩大肉汤营养培养基为葡萄糖10.0~20.0 g、蛋白胨5.0~8.0 g、牛肉膏3.0~5.0 g、氯化钠3.0~5.0 g、水1000 mL的比例混匀，在0.1 MPa压力下灭菌25~30 min，冷却至室温而成。

4.根据权利要求1所述的茶籽饼粕的生物脱毒方法，所述步骤⑴中的酵母液体培养基葡萄糖30.0~50.0 g、酵母浸膏3.0~5.0 g、氯化钠2.0~3.0 g、及磷酸二氢钾5.0~8.0 g、水1000 mL的比例混匀，在0.1 MPa压力下灭菌25~30 min，冷却至室温而成。