[发明专利]一种筛查牛退化性轴突病携带者的方法及其试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及畜牧业技术领域，具体地说是一种筛查牛退化性轴突病携带者的方法及其试剂盒。

背景技术

退化性轴突病(Degenerative axonopathy)是牛的一种常染色体单基因控制的隐性遗传病。通过全基因组关联分析和单倍体型图最终确定是由位于牛16号染色体上的线粒体融合素2(MFN2)基因的一个点突变引起的(C，Reichart U，Seuberlich T，et al.An unusual splice defect in the mitofusin 2 gene(MFN2)is associated with degenerative axonopathy in Tyrolean Grey cattle.PLoS One，2011，6(4)：e18931)。等对44头患有退化性轴突病牛的DNA测序分析，结果都发现有一个共同的同义突变位点，SNP c.2229C＞T，它位于MFN2基因第18个外显子内。c.2229C＞T突变影响了一个CpG二核苷酸，在哺乳动物中此位点有相当高的突变频率。c.2229C＞T突变位点位于一个潜在的外显子剪接增强子(ESE)基序内。T的突变消除了剪接因子ASF/SF-2一个潜在的结合位点，同时，增强了与辅助因子剪接蛋白SC35结合的能力。c.2229C＞T突变影响MFN2基因转录的剪接，除了产生野生型转录本外，又产生了一个保留第18个内含子的新转录本。新转录本的第18个内含子前端提前引入了终止密码子，导致新转录本相对于野生型转录本缺少最后22个密码子的开放阅读框，表达的MFN2蛋白相对于野生型转录本缺少一个C末端。

患有退化性轴突病的牛在1～1.5月龄时，四肢开始显示出不断加重的运动失调，而且后肢行动不稳键比前肢表现得更为突出。随着这些症状的加重，最终导致牛呈躺或斜靠体态。神经病理学发现受影响牛明显表现出两侧对称的轴突退化，使得背侧脊髓小脑束和薄束的轴突密度降低(Syring C，C.Oevermann A，Pfister P，Henke D，et al.Degenerative axonopathy in a Tyrolean Grey calf.J Vet Intern Med，2010，24：1519-1523)。许多患病的牛在8～10月龄被淘汰，给养牛业生产带来了巨大的经济损失。