[发明专利]副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗的生产方法有效
申请号: | 201110431884.2 | 申请日: | 2011-12-21 |
公开(公告)号: | CN102499982A | 公开(公告)日: | 2012-06-20 |
发明(设计)人: | 郭莉莉;程增青;马爽;周旭斌;申洪银;冯阳;李金积;王福军;刘晓东;王宗升 | 申请(专利权)人: | 青岛易邦生物工程有限公司 |
主分类号: | A61K39/116 | 分类号: | A61K39/116;A61K39/102;A61P31/04 |
代理公司: | 北京君智知识产权代理事务所 11305 | 代理人: | 郑明 |
地址: | 266032 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 嗜血 杆菌 三价灭活 疫苗 生产 方法 | ||
1.一种副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗,其特征是该疫苗含有经甲醛溶液灭活的副猪嗜血杆菌4型YBH04株、5型YBH05株和13型YBH13株及常规的矿物油佐剂,以上3个菌株已于2011年11月23日送交北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏,保藏编号分别为:CGMCC No.5479、CGMCC No.5480和CGMCC No.5501。
2.权利要求1一种副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗的生产方法,其特征在于:
(1)菌液培养与灭活采用发酵罐分别培养4、5、13型副猪嗜血杆菌CGMCC No.5479、CGMCC No.5480和CGMCC No.5501的菌液:按发酵罐容积的70%加入生产用的半合成培养基,同时加入消泡剂进行消毒,待其温度降至37~38℃时,按培养基总量的2%~2.5%将种子液分别加到发酵罐内,培养温度37~38℃、搅拌转速200r/min、pH 7.2、罐压0.03~0.05Mpa之间、溶氧量40%,培养时间9~10小时收获菌液,按菌液体积的0.3%加入甲醛溶液,37℃搅拌灭活24h,取样进行灭活检验后,置2~8℃保存;
(2)水相制备根据活菌计数结果,将灭活的4、5、13型副猪嗜血杆菌菌液均稀释成≥12×109CFU/ml后等量混合;
(3)疫苗制备按常规方法制备成矿物油佐剂灭活疫苗。
3.按照权利要求1和2所述的一种副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗及其生产方法,其特征是其中所使用半合成培养基是:胰蛋白胨大豆肉汤(Tryptic Soy Broth,TSB)培养基30g,加入去离子水,定容至1000mL,充分摇匀溶解,调pH至7.2~7.4,121℃高压蒸汽灭菌15min,待冷至55℃左右,按无菌要求加入50mL过滤除菌的牛血清、10mL过滤除菌的0.02%NAD。
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