[发明专利]一种甲型流感病毒抗原和乙型病毒流感抗原的联检试纸及其制备方法

权利要求书

1.一种甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原的联检试纸，所述试纸由样品垫、含有胶体金颗粒标记物的玻璃纤维膜、硝酸纤维素膜、吸水纸顺次搭接粘贴在底板上构成，其特征在于，所述胶体金颗粒标记物包括微信号放大系统和胶体金标记的兔IgG抗体，所述微信号放大系统为胶体金颗粒-亲和素-生物素-甲型或乙型流感病毒抗体；所述硝酸纤维素膜包括包被有甲型流感病毒抗体的检测区、包被有乙型流感病毒抗体的检测区和包被有羊抗兔抗体的控制区。

2.根据权利要求1所述的甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原的联检试纸，其特征在于，所述胶体金颗粒-亲和素-生物素-甲型或乙型流感病毒抗体的用量为42.5-90μg/cm²。

3.根据权利要求1所述的甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原的联检试纸，其特征在于，所述胶体金标记的兔IgG抗体的用量为25-45μg/cm²。

4.根据权利要求1所述的甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原的联检试纸，其特征在于，所述检测区甲型流感病毒抗体用量为0.144-0.28μg/mm，所述检测区乙型流感病毒抗体用量为0.144-0.28μg/mm。

5.根据权利要求1所述的甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原的联检试纸，其特征在于，所述羊抗兔抗体为羊抗兔IgG抗体，所述羊抗兔抗体的用量为0.18-0.44μg/mm。

6.根据权利要求1-5任一项所述的甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原的联检试纸，其特征在于，所述胶体金颗粒-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体的用量为70-72μg/cm²；所述胶体金颗粒-亲和素-生物素-乙型流感病毒抗体的用量为74-76μg/cm²；所述胶体金标记的兔IgG抗体的用量为30-36μg/cm²；所述检测区甲型流感病毒抗体用量为0.21-0.22μg/mm，所述检测区乙型流感病毒抗体用量为0.23-0.24μg/mm；所述羊抗兔抗体的用量为0.30-0.35μg/mm。

7.一种制备权利要求1所述的甲型流感病毒抗原和乙型流感病毒抗原的联检试纸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)按常规方法制备甲型流感病毒抗体、乙型流感病毒抗体以及胶体金标记的兔IgG抗体；

(2)制备微信号放大系统

a、制备胶体金标记亲和素

将待标记亲和素预先在0.001～0.01mol/L的NaCl溶液中透析过夜，离心，用PBS调节胶体金液的pH为8～9，按1ml胶体金溶液中加入15～25μg亲和素的量，标记亲和素以形成胶体金标记亲和素；

b、按常规方法制备生物素化甲型流感病毒抗体和生物素化乙型流感病毒抗体；所述生物素与甲型流感病毒抗体的质量比为1∶9，所述生物素与乙型流感病毒抗体的质量比为1∶10；

c、完成微信号放大系统

按1ml胶体金标记亲和素中加入100μl生物素化甲/乙型流感病毒抗体的量，将胶体金标记亲和素和生物素化甲/乙型流感病毒抗体混合，连接得到胶体金-亲和素-生物素-甲/乙型流感病毒抗体，洗涤，即得微信号放大系统；

(3)按稀释参数20cm²/ml～40cm²/ml，将步骤(2)的胶体金-亲和素-生物素-甲型流感病毒抗体、以及胶体金-亲和素-生物素-乙型流感病毒抗体喷洒到玻璃纤维膜上，干燥后备用；

(4)用包被缓冲液稀释甲型流感病毒抗体，使其浓度为0.9mg/ml～1.4mg/ml，按膜液量0.16μl/mm～0.2μl/mm，将其细致均匀的喷到硝酸纤维素膜上，干燥后备用；

用包被缓冲液稀释乙型流感病毒抗体，使其浓度为0.9mg/ml～1.4mg/ml，按膜液量0.16μl/mm～0.2μl/mm，将其细致均匀的喷到硝酸纤维素膜上，干燥后备用；

用包被缓冲液稀释羊抗兔抗体，使其浓度为1.0mg/ml～2.0mg/ml，按膜液量0.18μl/mm～0.22μl/mm，将其细致均匀的喷到硝酸纤维素膜上，干燥后备用；

(5)将样品垫、步骤(3)的玻璃纤维膜、步骤(4)的硝酸纤维素膜、吸水纸按序粘贴于底板上，即得。