[发明专利]一种刺果紫玉盘素A的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种从刺果紫玉盘根中分离制备刺果紫玉盘素A的方法。

背景技术

刺果紫玉盘素A，无色片状结晶，mp.96～98℃，来源于番荔枝科植物刺果紫玉盘Uvaria calamistrata Hance的根。刺果紫玉盘分布在越南以及中国大陆的广西、广东等地，多生长于山地林中以及山谷水沟旁灌木丛中。

刺果紫玉盘根主要有效成分为乙酰精宁类化合物，以刺果紫玉盘素A含量最高。刺果紫玉盘素A具有细胞毒活性，有显著的选择性细胞毒活性，对KB、A2780和HCT-8三种人型癌细胞株呈显著的细胞毒活性，IC₅₀(μg/mL)相应为2.0、1.4和0.37。目前，番荔枝科植物次生代谢物番荔枝乙酰精宁类（annonanceous acetogenins，AAGs）化合物被视为新的抗肿瘤药物的潜在资源，AAGs能抑制人卵巢瘤IA9细胞复制、诱导癌细胞凋亡，是强效的复合物I抑制剂，抗肿瘤药物的候选药物。

目前，尚未见高含量刺果紫玉盘素A的制备方法相关专利报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种刺果紫玉盘素A的制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

（1）取刺果紫玉盘根，经粉碎处理，加5-12倍60-90%乙醇溶液在20-45℃的温度下进行连续逆流超声提取30-100min，过滤，得到提取液；

（2）提取液通过截留分子量为1000-3000的超滤膜超滤和截留分子量为100-500的纳滤膜浓缩，操作压力为0.5-2.8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；

（3）采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的刺果紫玉盘素A，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集刺果紫玉盘素A组分；

（4）将刺果紫玉盘素A组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入85%甲醇回流溶解，放置重结晶，过滤、洗涤干燥即得刺果紫玉盘素A。

所述步骤（1）中超声频率为35-60KHz。

所述步骤（3）中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统的体积比为5-7:2-4:4-7:1-3。

本方法积极效果是：

（1）本方法采用连续逆流超声提取，实现了超声提取和连续逆流提取同时进行，提取效果好，同时实现连续作业；

（2）本方法采用膜分离技术，能有效去除多种杂质，且不会破坏有效成分的生物活性，而且与连续逆流超声提取相结合，实现提取浓缩连续作业；

（3）本方法采用高速逆流色谱法，收率高、制备量大、制备周期短，解决了柱层析效率低而且污染严重的技术缺陷；

（4）本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

取刺果紫玉盘根，经粉碎处理，称取1kg，加5倍90%乙醇溶液在45℃的温度下进行连续逆流超声提取30min，超声频率为60KHz，过滤，得到提取液，提取液通过截留分子量为3000的超滤膜超滤和截留分子量为500的纳滤膜浓缩，操作压力为0.8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的刺果紫玉盘素A，以体积比5:4:6:1石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水为两相溶剂系统，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集刺果紫玉盘素A组分，进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入85%甲醇回流溶解，放置重结晶，过滤、洗涤干燥即得刺果紫玉盘素A，含量96.5%。

实施例2：