[发明专利]一种药物的指纹图谱及其测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及质量标准测定方法，具体涉及一种药物的指纹图谱及其测定方法。 

背景技术

一清胶囊是由汉代医学名著《金匮要略》中的“泻心汤”发展而来，其配方由大黄、黄芩、黄连组成，功用为泻火解毒、燥湿泄热，主治邪火内炽，迫血妄行，吐血，衄血，便秘溲赤；三焦积热，眼目赤肿，口舌生疮，外证疮疡，心胸烦闷，大便秘绪；湿热黄疸，胸中烦热痞满，舌苔黄腻，脉数实者。一清胶囊和颗粒是由根据该汉代处方发展而来，其中一清胶囊的功能主治：清热泻火解毒，化瘀凉血止血。用于火毒血热所致的身热烦躁、目赤口疮、咽喉牙龈肿痛、大便秘结、吐血、咯血、衄血、痔血；咽炎、扁桃体炎、牙龈炎见上述症候者。《中华人民共和国药典》(2005版)第一部401-402页记载了一清胶囊和颗粒的处方及制备工艺。其中一清胶囊的处方为：黄连660g、大黄2000g、黄芩1000g；制法为：以上三味药材，分别加水煎煮两次，第一次1.5小时，第二次1小时，合并煎液，滤过，滤液分别减压浓缩，喷雾干燥，制得黄芩浸膏粉及大黄、黄连的混合浸膏粉。两种浸膏粉分别制颗粒，干燥，粉碎，加入淀粉、滑石粉和硬脂酸镁适量，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。含量测定为：本品每粒含黄芩以黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)计，不得少于30.0mg；含大黄以大黄素(C₁₅H₁₀O₅)和大黄酚(C₁₅H₁₀O₄)的总量计，不得少于0.70mg。 

《中国药典》2010年版规定黄芩药材含黄芩苷(C₂₁H₁₈O₁₁)不得少于9.0％，黄芩饮片不得少于8.0％；大黄药材含芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚的总量不得少于1.5％(按《中国药典》2010年版含量测定项目方法，检测多批大黄药材结果大黄素和大黄酚约占上述5种成分总量的50％，即大黄含大黄素和大黄酚的总量不得少于0.75％)。按此计算，一清胶囊黄芩中有效成分黄芩苷的提取率只有40％左右，大黄中有效成分大黄素和大黄酚的提取率仅有5％左右。 

目前市场上存在一清产品由一清胶囊、一清颗粒以及一清软胶囊等等，制剂形式多样；而随着目前中药材的价格升高，使得降低药材量的一清新处方和工艺变为研究重点，如CN102178753A通过改变提取工艺，降低50％-95％的药材用量，来获得新组成的一清；同时由于野生药材资源的匮乏，人工大规模的种植大黄、黄芩和黄连也变为开发重点。鉴于目前市场上目前一清制剂形式的多样，配方的不同、提取方法不同以及药材本身的种植模式的改变，治疗效果也会存在一定的差异，因此，一清制剂的质量监控方法变得十分重要。目前，药典以及其他文献给出的一清质量监控方法，多采用薄层色谱法鉴别内容物，而对于含量多 是以大黄中的大黄素和大黄酚，黄芩中的黄芩苷作为含量鉴定的标准。但是一清中大黄、黄芩和黄连中的每单个成分中均含有大量的其他成分，如大黄中主要的化学成分为蒽醌衍生物、苯基丁酮吡喃葡萄糖，二苯乙烯、丹宁酸和萘衍生物等[W.Jin，Y.F.Wang，R.L.Ge，H.M.Shi，C.Q.Jia，P.F.Tu.Simultaneous analysis of multiple bioactive constituents in Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.by high-performance liquid chromatography coupled to tandem mass spectrometry，Rapid Communications in Mass Spectrometry，2007，21(14)：2351-2360.]；黄芩的主要化学成分为黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷和汉黄芩素等黄酮类物质，目前已报道的黄酮有60多种，主要以葡萄糖苷的形式存在[温华珍，肖盛元，王义明，罗国安.黄芩化学成分及炮制学研究，天然产物研究与开发，2004，16：575-580；J.Han，M.Ye，M.Xu，J.H.Sun，B.R.Wang，D.Guo.Characterization of flavonoids in the traditional Chinese herbal medicine-Huangqin by liquid chromatography coupled with electrospray ionization mass spectrometry，Journal of Chromatography B，2007，848：355-362；G.Z.Liu，J.Y.Ma，Y.Z.Chen，Q.Q.Tian，Y.Shen，X.S.Wang，B.Chen，S.Z.Yao.Investigation of flavonoid profile of Scutellaria baicalensis Georgi by high performance liquid chromatography with diode array detection and electrospray ion trap mass spectrometry，Journal of Chromatography A，2009，1216(23)：4809-4814.]；黄连的主要活性成分为原小蘖碱、吲哚类生物碱和喹啉酮生物碱等[X.B.Luo，B.Chen，S.Z.Yao.Simultaneous analysis of protoberberine，indolequinoline and quinolone alkaloids in coptis-evodia herb couple and the Chinese herbal preparations by high-performance liquid chromatography-electrospray mass spectrometry，Talanta，2005，66(1)：103-110]。因此如何更精确的监控一清制剂的质量标准成为了新的研究热点。