[发明专利]一个基于纳米技术的PSA高敏感检测方法

权利要求书

1.一种基于纳米技术的微量蛋白质检测方法，其特征在于将磁珠探针技术、金纳米颗粒双标探针技术、免疫酶联吸附技术和核酸扩增技术四者结合起来。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于方法为免疫酶联的金纳米颗粒双标探针PCR检测法。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)在液相中利用双抗夹心法捕捉待测蛋白质；

(2)金纳米颗粒双标探针的制备；

(3)DTT对金纳米颗粒双标探针上的核酸进行释放；

(4)核酸扩增；

(5)信号处理。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于步骤(1)在液相中利用双抗夹心法捕捉待测蛋白质为：

磁珠探针在液相中利用免疫酶联吸附方法捕捉PSA等蛋白质并与带有抗体和核酸修饰的金纳米颗粒双标探针作用，形成夹心结构。

5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于步骤(2)金纳米颗粒双标探针的制备为：将PSA特异性抗体和具有特定序列的核酸同时修饰在金纳米颗粒表面。

6.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于步骤(3)DTT对金纳米颗粒双标探针上的核酸进行释放为：

将DTT溶于一定pH的PB溶液中，使其终浓度达到0.5M，对金纳米颗粒双标探针上的核酸进行释放。

7.根据权利要求书3所述的检测方法，其特征在于步骤(4)核酸扩增为：

对洗脱下来的核酸进行PCR扩增，使其实现信号放大。

8.根据权利要求书3所述的检测方法，其特征在于步骤(5)信号处理为：

采用图像分析软件获取信号的灰度值，进行定量分析。