[发明专利]一种卵黄免疫球蛋白缓释制剂的制备方法和用途

权利要求书

1.一种卵黄免疫球蛋白缓释制剂的制备方法和用途，其特征是：卵黄免疫球蛋白缓释制剂采用人型轮状病毒为免疫原，MA-104细胞为病毒培养宿主细胞，牛型WC3株为病毒生产株，MA-104细胞为病毒培养宿主细胞，通过病毒培养，收获病毒液，经纯化、超滤浓缩获得双价病毒液，经灭活后注射到SPF母鸡体内，经此免疫后，取鸡蛋卵黄经分离提取、纯化得到卵黄免疫球蛋白，再加入卵磷脂制成注射液。

2.一种卵黄免疫球蛋白缓释制剂的制备方法和用途，如权利要求1所述，其特征是：所用人型轮状病毒为Wa株和猴型SA11株的二联体。

3.一种卵黄免疫球蛋白缓释制剂的制备方法和用途，如权利要求1所述，其特征是：卵黄免疫球蛋白缓释制剂的用途为：可有效替代抗生素预防和治疗因耶尔森菌、肠毒性大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、幽门螺杆菌等感染引起的胃肠道疾病。

4.一种卵黄免疫球蛋白缓释制剂的制备方法和用途，如权利要求1所述，其特征是：抗轮状病毒卵黄抗体的制备方法如下步骤：

(1)细胞培养

将MA-104细胞用旋转培养瓶连续传代培养，用胰蛋白酶处理细胞，加入病毒液，然后吸去病毒液，以维持液继续培养，至细胞病变达75％时收获病毒液；

(2)病毒培养液的纯化

病毒培养液反复冻融三次，间断超声破碎，离心，上清中加入PEG6000，放置过夜，离心，沉淀用PBS重悬，上样至Sepharose GL-4B进行凝胶过滤，收集主峰后超滤浓缩，浓缩液进行免疫学、蛋白浓度和CPE测定；

(3)动物免疫

采用六月龄无特定病原体(SPF)产蛋母鸡注射灭活双价病毒液+不完全福氏佐剂，待卵黄免疫球蛋白中和效价达400单位/ml后收集鸡蛋进行卵黄免疫球蛋白提取；

(4)免疫鸡蛋的处理

免疫鸡蛋表面无菌处理，去蛋清后匀化处理，匀化后静置过夜；

(5)免疫球蛋白纯化

上清加入饱和硫酸铵梯度沉淀，静置，离心，沉淀用PBS重悬，经Sepharose 4FF柱层析凝胶过滤纯化，收集免疫球蛋白峰经超滤脱盐浓缩；

(6)制剂制备

加入卵磷脂制成注射液。