[发明专利]基于SAA1β/β纯合子基因型的肝硬化预后诊断和/或肝硬化诊断的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及利用甄别SAA1(血清淀粉样蛋白A1)基因型来实现对肝硬化预后诊断和/或肝硬化诊断的方法，具体涉及了一种基于血清淀粉样蛋白A1SAA1β/β纯合子基因型的肝硬化预后诊断和/或肝硬化诊断的检测方法，包括适用于临床应用的试剂盒。 

背景技术

人类血清淀粉样蛋白A1(Serum Amyloid A1，SAA1)是一种由104个氨基酸组成的急性期反应蛋白。其在天然状态时的分子量大约为12-14kDa，其编码基因位于人类第11号染色体。早期的研究认为SAA1是一种急性炎性蛋白，因为在急性炎症中，SAA1可由肝脏活化的巨噬细胞和纤维母细胞合成，浓度达正常水平的100-1000倍(正常值一般为910±270微克/升)。此外，SAA1在生理状态下可与高密度脂蛋白(HDL)结合，在炎症期间通过调节高密度脂蛋白代谢而使其水平升高。但是，近年来大量研究表明：SAA1已经不仅是传统意义上的急性期炎症蛋白，而是作为天然固有免疫的调理素，SAA1可与IL-6、TNF-a等炎症性细胞因子相互作用，参与调节机体的固有免疫和获得性免疫。如已经发现SAA1在糖尿病、冠心病、类风湿性关节炎(RA)等慢性炎症疾病和自身免疫病的发生、发展中扮演了重要的角色。 

在肝脏疾病发生中，香港大学He博士等发现，在由肝炎引起的肝硬化及肝癌病人的肝组织中，SAA1蛋白明显增高。众所周知，乙肝病毒感染后有着“肝炎-肝硬化-肝癌”三部曲表现，其中肝硬化是基于病毒侵犯肝脏后导致肝细胞长期慢性炎症、肝细胞死亡并由肝脏纤维组织增生发展而来。其中，SAA1是否参与上述病变至今未见报道。但是法国巴斯德研究所的研究表明：SAA1蛋白与肝炎病毒的感染有着密切的关系，乙肝病毒X基因(该基因与肝硬化及肝癌形成有关)转基因小鼠的肝组织中SAA1蛋白表达明显受抑，提示SAA1可能与HBV感染和后续肝硬化等病变有关。 

SAA1基因基于α、β、γ等位基因可分为α/α，α/β，α/γ，β/β，β/γ，γ/γ6种基因型。不同的SAA1基因型在人群中所占的比例存在一定的差异性。近年来，越来越多的研究聚焦在了SAA1基因型与疾病的关系上。众多研究表明，SAA1基因型确实和疾病有相关性。例如，Yamada等对321名日本人SAA1基因型的研究发现，α(1.1)、β(1.5)、γ(1.3)这3种等位基因在日本人中的分布频率分别为0.310，0.347，0.330。Ishii等发现，在127例RA患者中，发生淀粉样变者最常见的基因型是SAA1γ/γ(1.3/1.3)。淀粉样沉积物的出现和SAA1γ的基因频率高度相关。且在γ/γ纯合子基因型中，血清SAA1蛋白的浓度水平，以及SAA1与同为急性期反应蛋白CRP的比值高于其他基因型。而在高加索人中，淀粉样变与SAA1α等位基因的频 率呈正相关。在地中海出血热的研究中，有文献报道，SAA1α型的发病率是其他型别的7倍。而在SAA1的SNP分析研究中，也有报道表明不同的基因型在HDL-C的水平上存在显著差异。而SAA1基因型与肝硬化的相关性研究至今未见报道。