[发明专利]基于SAA1β/β纯合子基因型的肝硬化预后诊断和/或肝硬化诊断的检测方法

权利要求书

1.一种基于SAA1β/β纯合子基因型的肝硬化预后诊断和/或肝硬化诊断的检测方法，其特征在于，依据SAA1α、β、γ三个等位基因的核苷酸序列合成引物，对待测样品进行实时荧光定量等位基因特异性PCR，依据CT值及溶解曲线判断PCR扩增产物的基因型，经检测PCR产物的基因型为β/β基因型的，则待测样品属于肝硬化的易感人群。

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述引物包括：

A3套引物

所述上游引物5’-3’序列(Seq ID No.1)为：TCCCTTCTGCCTTTCCTTTCCTTTCC；

所述下游引物5’-3’序列(Seq ID No.2)为：TTACGTGATCGCTTCTGCAGCCCAGG；

A2套引物

所述上游引物5’-3’序列(Seq ID No.1)为：TCCCTTCTGCCTTTCCTTTCCTTTCC；

所述下游引物5’-3’序列(Seq ID No.3)为：TTACGTGATCGCTTCTGCAGCCCAGA；

B3套引物

所述上游引物5’-3’序列(Seq ID No.1)为：TCCCTTCTGCCTTTCCTTTCCTTTCC；

所述下游引物5’-3’序列(Seq ID No.4)为：TCCCAGGAGCTCCAGTTACGTGATCG；

B2套引物

所述上游引物5’-3’序列(Seq ID No.1)为：TCCCTTCTGCCTTTCCTTTCCTTTCC；

所述下游引物5’-3’序列(Seq ID No.5)为：TCCCAGGAGCTCCAGTTACGTGATCA。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述引物还包括含引物序列(Seq ID No.1～SeqID No.5)的延伸引物系列。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述引物3’端末端进行硫代磷酸化修饰。

5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述实时荧光定量等位基因特异性PCR中，退火温度为60-67℃之间，PCR扩增片段长度为120-200bp；待测基因组DNA浓度范围为5-15ng之间。

6.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述肝硬化由肝脏疾病发展而成。

7.一种基于SAA1β/β纯合子基因型的肝硬化预后诊断和/或肝硬化诊断的试剂，其特征在于，其用于实施如权利要求1所述的检测方法，包括如权利要求2所述的引物；含人SAA1α、β、γ等位基因基因组DNA片段的质粒为阳性对照；pfu DNA聚合酶；荧光染料SYBR GreenI，及荧光校正染料ROX。

8.一种试剂盒，其特征在于，其用于实施如权利要求1所述的检测方法，包括如权利要求6所述的试剂。