[发明专利]一种从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺

说明书

技术领域

本发明涉及中药成分制备领域，具体涉及一种从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺。 

背景技术

传统中药马钱子，为马钱科植物马钱(Strychnos nux-vomica L.)的干燥成熟种子，具有通络止痛、散结消肿的功效。现代研究表明其主要有效成分为生物碱类，含量约为生药的1.5％～5％，主要是士的宁(strychnine)、马钱子碱(brucine)及其氮氧化物等，其中又以士的宁含量居首，占1.2％～2.2％；马钱子碱占0.8％左右，是一种弱碱性的吲哚类生物碱，分子式为C₂₃H₂₆N₂O₄，相对分子质量394，为白色结晶性粉末，味极苦；微溶于水，可溶于乙醚、氯仿、乙醇、甲醇等有机溶剂，其含量大约占马钱子总生物碱的30％～40％，国内外学者研究证明其具有显著的镇痛、抗炎、抗肿瘤、中枢神经系统兴奋等作用。 

马钱子总碱主要成分为士的宁和马钱子碱，士的宁和马钱子碱在结构上影响极性差异为苯环上2，3号位，士的宁比马钱子碱多两个甲氧基。结构如下图： 

由于分离难度大，相关文献研究也较少，其中仅有文献(李 等，pH区带逆流色谱法分离纯化马钱子中马钱子碱和士的宁，分析化学，2010，38(12)：17033-1707)报道从308mg马钱子总生物碱中分离得到50mg马钱子碱和120mg士的宁，得率分别为72.8％和85.1％；纯度分别为96.8％和98.3％，此方法存在产量小的不足，市场急需一种马钱子碱规模化生产的制备工艺。 

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的工艺，分离得到高纯度的马钱子碱，并实现克级规模化生产。 

技术方案：本发明的目的是通过如下的方案实现的： 

一种从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺，具体步骤包括： 

(1)将马钱子总碱用二氯甲烷或三氯甲烷溶解后，与硅胶混合均匀，挥去有机溶剂至干，作为硅胶柱层析上样分离的样品； 

(2)取重量为步骤(1)所得上样样品10～50倍的硅胶干法或湿法装柱，敲实，得分离用硅胶柱； 

(3)取步骤(1)所得样品上样于步骤(2)制备的硅胶柱上； 

(4)用乙醇洗脱，分段收集洗脱液，每段洗脱液为2倍柱体积，以薄层色谱法鉴别为含单一马钱子碱成分，合并单一马钱子碱成分各段洗脱液，浓缩得马钱子碱粗品；或先用乙醇洗脱，收集1～2倍柱体积的洗脱液，后用含醋酸铵的乙醇溶液洗脱，分段收集洗脱液，每段为2倍柱体积，以薄层色谱法鉴别为含单一马钱子碱成分，合并乙醇洗脱液和含单一马钱子碱成分含醋酸铵的乙醇溶液各段洗脱液，浓缩得马钱子碱粗品； 

(5)将步骤(4)所得马钱子碱粗品加适量水混悬，用二氯甲烷或三氯甲烷萃取，有机层减压干燥，纯化得马钱子碱。 

上述从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺，步骤(1)中与马钱子总碱混合所用的硅胶为80～100目或200～300目，硅胶与马钱子总碱的重量比为4∶5～2∶1；步骤(2)中制备硅胶柱所用硅胶为200～300目。 

上述从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺，步骤(2)中湿法装柱所用的溶剂为浓度为95％以上的乙醇溶液，所制备的硅胶柱的柱高与柱径比为3∶1～6∶1。 

上述从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺，步骤(4)中所用的洗脱溶剂乙醇浓度为95％以上。 

上述从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺，所用的洗脱溶剂含醋酸铵的乙醇溶液中所含的醋酸铵浓度范围按质量体积比计为：1％～2％。 

上述从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺，步骤(1)中溶解马钱子总碱和步骤(5)中萃取所用的有机溶剂为二氯甲烷。 

上述从马钱子总碱中分离纯化马钱子碱的制备工艺，步骤(5)中二氯甲烷或三氯甲烷萃取的次数为3-6次，每次体积为马钱子碱粗品体积的5倍。 

以上所述原料马钱子总碱，是从马钱子中提取的生物碱，本工艺研究方法所用马钱子总碱是依照文献(李 等，pH区带逆流色谱法分离纯化马钱子中马钱子碱和士的宁，分析化学，2010，38(12)：1703-1707)所用方法制备所得，主要成分为士的宁和马钱子碱，其HPLC图谱见附图4。