[发明专利]一种基于Ipr1基因构建的巨噬细胞异性打靶载体和重组细胞

权利要求书

1.一种重组Ipr1基因，其特征在于，在Ipr1基因的上游连接牛巨噬细胞特异性启动子MSR1，构成重组基因MSR1-Ipr1。

2.如权利要求1所述的重组Ipr1基因，其特征在于，Ipr1基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，MSR1的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。

3.如权利要求1所述的重组Ipr1基因，其特征在于，在MSR1的上游连接如SEQ.ID.NO.3所示的同源臂LA，在Ipr1的下游连接如SEQ.ID.NO.4所示的同源臂SA，构成重组基因LA-MSR1-Ipr1-SA。

4.如权利要求3所述的重组Ipr1基因，其特征在于，在LA与MSR1之间还设有两个Loxp序列，两个Loxp序列之间设有抗生素正筛选基因。

5.一种重组Ipr1基因构建的巨噬细胞特异性打靶载体，其特征在于，在通用型打靶载体上克隆重组基因MSR1-Ipr1，并克隆包含牛28号染色体SP-A与MAT1A基因之间间隔序列的同源臂。

6.一种重组Ipr1基因构建的巨噬细胞特异性打靶载体，其特征在于，所述的通用型打靶载体为pA2T，在SVpolyA与Loxp1序列之间克隆如SEQ.ID.NO.3所示的同源臂LA，在Loxp2序列的下游克隆重组基因MSR1-Ipr1，并在重组基因MSR1-Ipr1的下游克隆如SEQ.ID.NO.4所示的同源臂SA，得到重组打靶载体pLMIS。

7.基于权利要求6所述的重组Ipr1基因构建的巨噬细胞特异性打靶载体构建的重组细胞，其特征在于，以新生牛耳成纤维细胞为宿主细胞，通过转染重组打靶载体pLMIS，将目的基因Ipr1整合到宿主细胞的基因组。

8.如权利要求7所述的重组细胞，其特征在于，所述的目的基因Ipr1整合到牛28号染色体SP-A与MAT1A基因之间。

9.如权利要求7所述的重组细胞，其特征在于，所述的宿主细胞为8～10代的新生牛耳成纤维细胞，将酶切后线性化的重组打靶载体pLMIS通过电穿孔转染的方式转染宿主细胞。

10.权利要求7所述的重组细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞的应用。