[发明专利]一种通过白蛋白纳米粒吸附灯盏花素制备的灯盏花素白蛋白纳米粒

说明书

技术领域

本发明涉及一种载有灯盏花素的白蛋白纳米粒及通过白蛋白纳米粒吸附灯盏花素的制备方法，属于制剂技术领域。

背景技术

灯盏花素是从天然植物灯盏花中提取的黄酮类化合物，其主要成分为灯盏花乙素。现代药理研究证明，灯盏花素扩张微细动脉，提高心脏功能及心脑供血；降低血液粘度，抗血小板、红细胞聚集，提高红细胞变形能力。增加组织灌注量，改善微循环及代谢；清除自由基防止组织再灌注性损伤，降低白细胞自发活率。临床适应证为脑血栓、脑出血恢复期，冠心病心绞痛、心肌梗死、高粘血症，一切缺血性及伴有严重循环障碍性疾病。近年研究发现灯盏花素在糖尿病肾病、肺间质纤维化及抗肿瘤药增效等方面也有较好的应用前景。据文献研究，灯盏花素有溶解度低(水中溶解度为20.47±0.26μg/ml)、口服生物利用度低(犬口服生物利用度为0.40±0.19％)、半衰期短(犬口服消除半衰期为79.98±44.50min，犬静注消除半衰期为55.70±19.09min)等缺点。

白蛋白纳米粒是以白蛋白为载体的一类纳米制剂。因具有良好的稳定性，在病变组织优先摄取性，易得性，生物降解性，毒性和免疫原性小的特点，而成为药物的理想载体。此外，白蛋白一个重要特性是它独特的空间结构使其具有结合其他物质的能力，有万能载体之誉。白蛋白多肽链上带有较多的极性基团，对很多成分具有高度的亲和力，能和70％小分子药物发生可逆结合。白蛋白二级结构中含有药48％的α-螺旋结构，15％的β-折叠片结构，其余为无规线团结构，因此具有很多的网状空隙，为携带药物创造了有利的空间条件。

近年来，国内外以白蛋白作为载体载药的方法大都以“内加法”，即在白蛋白制备形成白蛋白纳米粒的过程中将药物加入，最后制备成载药的白蛋白纳米粒。本发明借鉴大孔吸附树脂的原理，是通过将药物吸附在已制备好的空白白蛋白纳米粒上，以形成稳定的载药白蛋白纳米粒的一种方法。本方法不仅解决了灯盏花素水溶解度低的问题，并且其产物具有明显的缓释特征。本法，先通过去溶剂-化学交联法制备得到空白白蛋白纳米粒，接着将所得的空白白蛋白纳米粒冻干，然后将药物加入至复溶的空白白蛋白纳米粒充分混合吸附，最后得到载药的白蛋白纳米粒，冻干储备。

发明内容

本发明的目的是提供一种通过白蛋白纳米粒吸附灯盏花素制备的灯盏花素白蛋白纳米粒。

本发明的另一个目的是提供制备上述灯盏花素白蛋白纳米粒的方法。

因此，本发明提供了一种通过白蛋白纳米粒吸附灯盏花素制备的灯盏花素白蛋白纳米粒，它包括：

100体积份的白蛋白纳米粒混悬液；

10-500体积份的灯盏花素溶液；

其中白蛋白纳米粒混悬液为不同乙醇浓度的混悬液，灯盏花素溶液为乙醇溶液。

在本发明的一个优选实例中，所述灯盏花素白蛋白纳米粒包括：

100体积份的白蛋白纳米粒混悬液；

10-500体积份的灯盏花素溶液；

在本发明的这个优选实例中，所述的白蛋白纳米粒为浓度50％～80％乙醇溶液，白蛋白纳米粒浓度为0.1～5％，所述的灯盏花素为乙醇溶液，灯盏花素浓度为0.1～5.0mg/mL。

本发明另一个方面，提供了所述组合物的灯盏花素白蛋白纳米粒制备方法，它包括以下步骤：

(a)将冻干后的空白白纳米粒用蒸馏水超声复溶，离心去上清，洗去冻干保护剂(三次及以上)；

(b)将a中纯化后的空白白蛋白纳米粒用蒸馏水稀释至要求浓度，搅拌条件下滴加要求倍数体积量乙醇溶液，至白蛋白纳米粒浓度为要求浓度，乙醇浓度为要求浓度；

(c)将灯盏花素用乙醇溶解至要求浓度；

(d)在25℃、500r/min搅拌状态中，将b中滴加要求倍数量体积量c，持续搅拌1h；

(e)将d离心，除去上清液游离的灯盏花素，离心所得下部沉淀用0.01mol/L柠檬酸溶液重分散，既得灯盏花素白蛋白纳米粒混悬液，加入冻干保护剂冷冻干燥；

上述步骤d中所述的25℃、500r/min、1h均为优化后所得，并不代表唯一条件。

附图说明

图1为灯盏花素、图2为白蛋白纳米粒冻干粉、图3为灯盏花素和白蛋白纳米粒冻干粉的物理混合物、图4为灯盏花素白蛋白纳米粒冻干粉的差示扫描量热分析图。图5为灯盏花素纳米粒混悬液和灯盏花素溶液的体外释药曲线。

具体实施方式