[发明专利]一种玻璃酸钠中蛋白质的检测方法无效
| 申请号: | 201110401130.2 | 申请日: | 2011-12-06 |
| 公开(公告)号: | CN102495053A | 公开(公告)日: | 2012-06-13 |
| 发明(设计)人: | 薛亮 | 申请(专利权)人: | 上海景峰制药有限公司 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78 |
| 代理公司: | 上海天翔知识产权代理有限公司 31224 | 代理人: | 吕伴 |
| 地址: | 200120*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 玻璃 酸钠中 蛋白质 检测 方法 | ||
1.一种玻璃酸钠中蛋白质的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)标准曲线的制备:称取牛血清白蛋白对照品,加氢氧化钠试剂溶解定容,配制成200μg/ml的牛血清白蛋白储备液;将牛血清白蛋白储备液稀释,配制成2μg/ml、4μg/ml、8μg/ml、10μg/ml、20μg/ml的标准液;移取一定体积各标准液,置于试管中,两个空白管中移取标准液等体积的氢氧化钠试剂,于上述各管中加入标准液等体积的试剂E,立即在旋涡振荡器混合,室温放置5-15min,加入标准液3倍体积的试剂F,立即在旋涡振荡器混合后,在40-60℃水浴放置5-15min,以空白管为对照,测750nm下的吸光度,得出直线回归方程;
(2)样品溶液制备:称取玻璃酸钠中间体样品用标准液等体积的氢氧化钠试剂溶解后,加入标准液等体积的试剂E,立即在旋涡振荡器混合,室温放置5-15min,加入标准液3倍体积的试剂F,立即在旋涡振荡器混合后,在40-60℃水浴放置5-15min,以空白管为对照,测750nm下的吸光度;
(3)由直线回归方程,按下式计算玻璃酸钠中间样品中蛋白质含量,
式中,C表示样品试管溶液中蛋白质浓度,
W表示样品试管中玻璃酸钠中间样品质量,
所述氢氧化钠试剂的浓度为4.3mg/ml;
所述试剂E是将9.0mg/ml硫酸铜溶液,15.0mg/ml酒石酸钾纳溶液和含碳酸钠为100mg/ml、氢氧化钠为20mg/ml的溶液的体积比为1∶1∶3混合物;
所述试剂F是10倍稀释的福林酚。
2.如权利要求1所述的玻璃酸钠中蛋白质的检测方法,其特征在于,步骤(2)中1ml的氢氧化钠试剂中,加入玻璃酸钠中间体样品量为10mg。
3.如权利要求1所述的玻璃酸钠中蛋白质的检测方法,其特征在于,步骤(1)和步骤(2)中,室温放置的时间为10min。
4.如权利要求1所述的玻璃酸钠中蛋白质的检测方法,其特征在于,步骤(1)和步骤(2)中,水浴温度为50℃。
5.如权利要求4所述的玻璃酸钠中蛋白质的检测方法,其特征在于,步骤(1)和步骤(2)中,水浴放置时间为10min。
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