[发明专利]一种高纯度雷莫拉宁单组份的制备方法有效
| 申请号: | 201110393767.1 | 申请日: | 2011-12-02 |
| 公开(公告)号: | CN102838662A | 公开(公告)日: | 2012-12-26 |
| 发明(设计)人: | 段宝玲;张雪霞;李宁;李晓露;任风芝;陈书红;成晓迅;林毅;王海燕;李丽红;张金娟;林旸;张丽;张艳立;高月麒;张艳哲;蒋沁;董爱华 | 申请(专利权)人: | 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 |
| 主分类号: | C07K9/00 | 分类号: | C07K9/00;C07K1/16 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 050015 河北*** | 国省代码: | 河北;13 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 纯度 雷莫拉宁单组份 制备 方法 | ||
1.一种雷莫拉宁单组份的制备方法,包括下述步骤:
1)常温条件下,在雷莫拉宁发酵液中加入助滤剂,搅拌50分钟-1.5小时至助滤剂分散均匀,过滤,固液分离得到雷莫拉宁滤液;
2)滤液使用大孔脱色树脂脱色;
3)脱色液导入大孔吸附树脂进行吸附,饱和树脂用解吸剂解吸,得到解吸液;
4)解吸液浓缩,得到雷莫拉宁粗提物;
5)将雷莫拉宁粗提物用极性溶剂溶解,注入聚合物微球层析柱;
6)使用极性溶剂与水的混合液进行梯度洗脱,高效液相色谱仪(以下简称为HPLC)在线监测,分别收集HPLC含量大于95%的雷莫拉宁单组份A1、A2及A3洗脱液;
7)洗脱液分别浓缩、结晶,固液分离得到雷莫拉宁单组份粉末A1、A2及A3。
2.根据权利要求1所述的方法,其中步骤1)所述的助滤剂为珍珠岩或硅藻土,助滤剂的用量为每升发酵液加入助滤剂0.01-0.1千克。
3.根据权利要求1所述的方法,其中步骤2)所述大孔脱色树脂为D151、SDA-7、LX-700、D290、D309、D301树脂。
4.根据权利要求1所述的方法,其中步骤3)所述的大孔吸附树脂为DM130、HZ816、D71、D312、AB-8、D101树脂。
5.根据权利要求1所述的方法,其中步骤4)所述的浓缩、结晶,要求解吸液在30℃-50℃条件下真空浓缩,浓缩至雷莫拉宁浓度100g/L-120g/L。
6.根据权利要求1所述的方法,其中步骤5)和6)所述的极性溶剂各为甲醇、乙醇、异丙醇、乙腈中的一种。
7.根据权利要求1所述的方法,其中步骤5)所述聚合物微球是采用聚苯乙烯或聚丙烯酸酯及其衍生物制备的。
8.根据权利要求1所述的方法,其中步骤7)所述的结晶,要求雷莫拉宁三种单组份A1、A2及A3浓缩后浓度均控制在120g/L-150g/L,然后分别缓慢加入2-10倍结晶液体积的乙酸乙酯或丙酮,结晶液过滤后真空干燥,得到白色的雷莫拉宁三种单组份A1、A2及A3纯品。
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