[发明专利]一种沙美特罗替卡松复方吸入剂有关物质的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种复方药物制剂的检测方法，特别是针对沙美特罗、丙酸氟替卡松复方吸入剂同时检测有关物质的方法。

背景技术

沙美特罗替卡松粉吸入剂是英国葛兰素史克公司首先研制成功用于治疗成人和儿童哮喘的药物。该药含有沙美特罗与丙酸氟替卡松，两者有不同的作用方式。沙美特罗起控制症状的作用，而丙酸氟替卡松改善肺功能并预防病情恶化。本药能为同时使用β-激动剂和吸入型皮质激素治疗的病人提供更方便的方案。沙美特罗分子结构为一条能与受体外点结合的长链，为一种选择性的长效(12小时)β2-肾上腺素受体激动剂。与推荐剂量传统的短效β2-激动剂相比，沙美特罗的药理特性可提供更有效的针对组胺诱导的支气管收缩的保护作用，并产生至少持续12小时的更持久的支气管扩张作用。体外试验表明沙美特罗可抑制人肺部肥大细胞介质(如组胺、白三烯和前列腺素D2)的释放，是强有力的长效抑制剂。沙美特罗能抑制人体吸入过敏原后的速发与迟发反应，对后者的作用在单剂吸入后能持续30个多小时，直至不再有明显的支气管扩张作用。单剂沙美特罗可减弱支气管高反应性。这些特性提示沙美特罗还有非支气管扩张剂的活性，但其全面的临床意义尚不清楚。这一机制不同于皮质激素的抗炎作用。吸入推荐剂量的丙酸氟替卡松在肺内产生强效的糖皮质激素抗炎作用，因而减轻哮喘的症状及恶化，而没有使用全身性皮质激素的副作用。

沙美特罗替卡松干粉吸入剂是由羟萘甲酸沙美特罗(又名沙美特罗昔奈酸)、丙酸氟替卡松组成的的复方吸入剂，具有抗炎及持续的支气管扩张作用，是临床控制哮喘的重要药物。

但是该药剂量规格小，两种药物极性相差大，其有关物质的量就更加微小，同时由于两种化合物其杂质较多，这对有关物质分析方法的分离度方面要求较高，如果不能将上述物质尽可能的分离出来，也会造成有关物质检测方法的不准确。

目前已有文献报道高效液相色谱法测定沙美特罗有关物质(崔莺等，《HPLC法考察沙美特罗的有关物质》，黑龙江医药，2004，17(1)：21)和丙酸氟替卡松有关物质(Mistry N等.《Characterisation of impurities in bulk drug batches of fluticasone propionate using directly coupled HPLC-NMR spectroscopy and HPLC MS》，JPharm Biomed Anal，1997，16(4)：697)，但关于含沙美特罗和丙酸氟替卡松的复方制剂中有关物质的测定仅有文献1的报道。

文献1严翠霞等人报道(HPLC法测定沙美特罗替卡松粉吸入剂的有关物质，药物分析杂志，2010，30(1)，82)建立沙美特罗替卡松粉吸入剂有关物质的HPLC测定方法，方法：采用Phenomenex Luna C18色谱柱(4·6mm×250mm，5μm)，以0.05％磷酸溶液-甲醇(97∶3)为流动相A，0.05％磷酸乙腈溶液-甲醇(97∶3)为流动相B，进行梯度洗脱，沙美特罗替卡松主要成分峰与其相关物质峰完全分离，沙美特罗和丙酸氟替卡松浓度分别在0.045～4.5μg/mL和0.01～10.14μg/mL范围内呈良好线性关系，最低检测限分别为4ng和1ng。流速1mL/min，检测波长228nm，柱温40℃。

但是该方法在分析过程中存在一些问题：磷酸溶液的缓冲能力有限；该方法选择较高的柱温40℃，是由于较高的温度能改善弱碱性物质沙美特罗的拖尾，此时的拖尾因子大于1.3，但如果降低柱温，拖尾会更加严重，这会造成氟替卡松和沙美特罗的峰与有关物质的峰相互干扰，使有关物质的检测结果受到影响。而且，我们在用文献报道的方法测定自制样品中有关物质含量，发现丙酸氟替卡松有关物质2与丙酸氟替卡松的吸收峰分离度只有1.0，不符合2010年版中国药典要求。丙酸氟替卡松有关物质2为S-甲基6α，9α-二氟-11β-羟基-16α-甲基-3-羰基-17α-丙酰氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代甲酸酯。

发明内容

为克服现有技术中的上述缺陷，实现用高效液相色谱法一次进样可以检测沙美特罗替卡松粉吸入剂多种有关物质的目的，本发明提供了一种用高效液相色谱法检测沙美特罗氟替卡松吸入剂中有关物质的技术方案，本方法流动相A采用缓冲溶液，缓冲效果更好，可实现主药和有关物质的有效分离，各吸收峰间的分离度大于1.5，色谱柱温度在20℃～40℃内检测的沙美特罗拖尾因子均在1.1～1.2之间，减少拖尾，改善峰型。