[发明专利]一种重组溶葡萄球菌素位点特异性整合载体及其构建的重组细胞

权利要求书

1.一种重组溶葡萄球菌素基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。

2.如权利要求1所述的重组溶葡萄球菌素基因，其特征在于，在其5′端连接如SEQ.ID.NO.2所示的CSN5调控元件，在其3′端连接如SEQ.ID.NO.3所示的CSN3调控元件。

3.如权利要求2所述的重组溶葡萄球菌素基因，其特征在于，在CSN5调控元件的5′端还连接有如SEQ.ID.NO.4所示的att B序列，在att B序列的上下游还分别设有绝缘子序列。

4.如权利要求3所述的重组溶葡萄球菌素基因，其特征在于，所述的绝缘子序列为如SEQ.ID.NO.5所示的鸡β-乳球蛋白绝缘子序列。

5.如权利要求1～4任何一项所述的重组溶葡萄球菌素基因，其特征在于，在重组溶葡萄球菌素基因的在上游还连接有荧光标记基因，下游还连接有抗生素筛选基因。

6.如权利要求5所述的重组溶葡萄球菌素基因，其特征在于，所述的荧光标记基因与重组溶葡萄球菌素基因之间设有终止子或绝缘子序列，在抗生素筛选基因的上下游连接有loxp序列。

7.一种重组溶葡萄球菌素基因的乳腺特异性表达载体，其特征在于，包括SEQ.ID.NO.1所示的重组溶葡萄球菌素基因，其5′端连接如SEQ.ID.NO.2所示的CSN5调控元件，在其3′端连接如SEQ.ID.NO.3所示的CSN3调控元件；

CSN5调控元件的5′端还依次设有荧光标记基因及启动子，在CSN3调控元件与启动子之间设有抗生素筛选基因。

8.如权利要求7所述的一种重组溶葡萄球菌素基因的乳腺特异性表达载体，其特征在于，在荧光标记基因与CSN5调控元件之间还设有att B序列，在att B序列的上下游还分别设有绝缘子序列；在抗生素筛选基因的上下游连接有loxp序列。

9.基于权利要求8所述的重组溶葡萄球菌素的乳腺特异性表达载体构建的重组细胞，其特征在于，以荷斯坦奶牛胎儿成纤维细胞为宿主细胞，将线性化的重组溶葡萄球菌素的乳腺特异性表达载体与ΦC31整合酶的表达载体共转染到宿主细胞中。

10.权利要求8所述的重组细胞作为核移植构建转基因克隆胚的核供体细胞的应用。