[发明专利]一种丙氨酰谷氨酰胺化合物及其制法

说明书

技术领域

本发明涉及一种高纯度的丙氨酰谷氨酰胺化合物及其制法，属于医药技术领域。

背景技术

丙氨酰谷氨酰胺又名N-(2)-L-丙氨酰-L-谷酰胺，英文名L-alanyl-L-glutamine，化学名称为N(2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，分子式C₈H₁₅N₃O₄，分子量217.22，结构式为：

丙氨酰谷氨酰胺首先由德国森尤斯(Fresenius，AG)研制，1999年进口到中国。丙氨酰谷氨酰胺作为肠外营养药物，可用于提高患者细胞免疫功能，有效降低危重患者的感染风险，尤其对严重感染、恶性肿瘤等重伤病人的治疗和恢复有重要作用，可缩短患者总住院时间。临床研究表明，使用Gln对严重代谢疾病(如烧伤/外伤/大手术、急慢性感染、骨髓移植和多器官功能障碍综合症)、肠道功能不全(如肠炎短肠综合症和放化疗所致粘膜损害)、免疫缺乏综合症(如艾滋病、危重病或骨髓移植后伴发的免疫功能低下)等疾病具有良好的治疗效果。丙氨酰谷氨酰胺的使用能较好地维持血循环中淋巴细胞总数，缓解手术及化疗导致的免疫抑制，这可能与Ala-Gln提供给淋巴细胞充足的呼吸燃料有关。丙氨酰谷氨酰胺作为肠外营养的使用是十分有效的，能减轻胃肠癌手术化疗患者机体的蛋白分解，有效地改善氮平衡，维持血循环中淋巴细胞的数目，从而改善患者营养状况，增强机体对手术及化疗的耐受性。

国内外已经公开了多种合成丙氨酰谷氨酰胺的方法。例如：

欧洲专利(EPNO311.057)以苄氧羰丙氨酸(Z-ALa)在二环己基碳二亚胺(DCC)存在下生成活化酯，然后与谷氨酰胺(Gln)缩合成二肽，再经催化氢化脱保护基制得。该方法步骤较长，且需氢化脱保护基。

在欧洲专利595345(EP595345)中，提出了应用在与水不混溶的有机溶剂(常用为甲苯，氯仿或二氯甲烷)中，用光学活性α-卤代丙酰卤与谷氨酰胺在低温pH为10的条件下进行反应而制得光学纯的α-卤代丙酰谷氨酰胺，然后在氨水中氨化而制得相应的丙氨酰谷氨酰胺。该方法的不足是：光学纯的卤代丙酰卤很难获得，且价格昂贵。此外，在以上各制备方法中，每次仅可获得L-丙氨酰-L-谷氨酰胺和D-丙氨酰-L-谷氨酰胺二个非对映异构体中的一个，故使其推广应用受到了限制。

中国发明专利CN1392156公开了一种丙氨酰谷氨酰胺合成方法，N端保护的氨基酸与三苯基磷、六氯乙烷在有机溶剂中反应形成活泼酯；活泼酯与谷氨酰胺在有机溶剂和无机碱水溶液的混合溶液中进行，用无机酸酸化，然后脱去N端保护基团。但反应结束生成主产物丙-谷二肽和副产物三苯基氧磷。

CN1786019A公开了一种丙氨酰谷氨酰胺的制造方法，包括将酯化的L-乳酸在催化剂存在的条件下，与氯化亚砜反应，得2-氯丙酸酯；在2-氯丙酸酯中加碱液进行水解，得2-氯丙酸；将2-氯丙酸与氯化剂反应，得2-氯丙酰氯；将2-氯丙酰氯与L-谷氨酰胺反应，得N-(2-氯)-丙酰基-谷氨酰胺；将N-(2-氯)-丙酰基-谷氨酰胺与氨水进行反应，得丙-谷二肽产品等步骤。但在采用该合成方法的工业化生产工艺中，由于得到的反应液中含有氯化铵等杂质，需要进行结晶除盐。目前关于丙氨酰谷氨酰胺生产工艺中除盐的常规方法为采取醇(如甲醇、乙醇、异丙醇等)加水的方式进行结晶除盐。

因此，依然需要一种简单易行的制备甘氨酰-L-谷氨酰胺并且进行纯化的方法以提供高纯度的丙氨酰谷氨酰胺化合物。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高纯度的丙氨酰谷氨酰胺化合物，为此提供一种制备甘氨酰-L-谷氨酰胺并且进行纯化的方法，以N-(α-氯)-丙酰基-谷氨酰胺为原料，选择肼类作为氨化试剂，制备丙氨酰谷氨酰胺粗产物，经必要的后处理步骤进行纯化，制得纯度极高的目标产品，进而优化了制剂产品质量，减少了毒副作用，保证了临床用药的安全。

本发明人研究发现，通过包括如下步骤的制法，能够获得高纯度的丙氨酰谷氨酰胺化合物：

步骤1，以N-(α-氯)-丙酰基-谷氨酰胺为原料，选择肼类物质作为氨化试剂，在常压下进行反应，制得丙氨酰谷氨酰胺粗产物；

步骤2，在0℃至室温的温度下，向丙氨酰谷氨酰胺粗产物中加入无水甲醇，搅拌，抽滤除去甲醇溶液，获得含丙氨酰谷氨酰胺的滤饼；

步骤3，将含丙氨酰谷氨酰胺的滤饼溶于水中，所获得的水溶液升温至不高于80℃，保持一定时间进行浓缩，然后加入乙醇，使水溶液与乙醇的体积比为1∶1～3，并梯度降低温度，进行重结晶，获得提纯的丙氨酰谷氨酰胺。