[发明专利]一种N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法有效
| 申请号： | 201110384282.6 | 申请日： | 2011-11-28 |
| 公开（公告）号： | CN102492736A | 公开（公告）日： | 2012-06-13 |
| 发明（设计）人： | 孟祥河;潘秋月;陆丽梅 | 申请（专利权）人： | 浙江工业大学 |
| 主分类号： | C12P7/62 | 分类号： | C12P7/62 |
| 代理公司： | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人： | 黄美娟;王兵 |
| 地址： | 310014 浙*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 乙酰 谷氨酸 甘油酯 合成 方法 | ||
1.一种N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法，其特征在于所述方法为：以N-酰基氨基酸和甘油为底物，无溶剂条件下，在酶的作用下，30～80℃，反应1～96h，反应结束后反应液后处理，获得所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯；所述酶为固定化脂肪酶Novozyme 435、固定化脂肪酶Lipozyme RM IM、固定化脂肪酶Lipozyme TL IM、木瓜蛋白酶、脂肪酶FAP15、酰基转移酶或胰蛋白酶。
2.如权利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法，其特征在于所述N-酰基氨基酸与甘油的物质的量比为1∶5～30。
3.如权利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法，其特征在于所述酶为固定化脂肪酶Novozyme435或固定化脂肪酶Lipozyme RM IM。
4.如权利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法，其特征在于所述酶的质量用量以底物总质量计为0.5～10％。
5.如权利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法，其特征在于所述反应液后处理方法为：反应结束后，分别加入反应液体积1.5倍的5％NaCl溶液和反应液体积2倍的0.5mol/L碳酸氢钠溶液，搅拌至无气泡生成，过滤，滤液冷却至室温用有机溶剂萃取，收集有机相，干燥至恒重，获得所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯；所述有机溶剂为正己烷、氯仿或乙酸乙酯。
6.如权利要求1所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯的酶合成方法，其特征在于所述方法按以下步骤进行：将N-酰基氨基酸和甘油以物质的量比1∶20～30混合后作为底物，升温至70℃，无溶剂条件下，在固定化脂肪酶Novozyme 435的作用下，pH6.0～9.0磷酸缓冲溶液中，30～70℃反应96h，反应结束后，反应液中加入反应液体积1.5倍的5％NaCl溶液和反应液体积2倍的0.5mol/L碳酸氢钠溶液，搅拌至无气泡生成，过滤，滤液冷却至室温用有机溶剂萃取，收集有机相，干燥至恒重，获得所述的N-乙酰基谷氨酸甘油酯；所述固定化脂肪酶Novozyme 435的质量用量以N-酰基氨基酸和甘油总质量计为5～10％，所述有机溶剂为氯仿或乙酸乙酯。
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