[发明专利]盐酸托烷司琼原料及制剂中杂质3-吲哚甲酸的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及3-吲哚甲酸的检测方法，具体涉及一种盐酸托烷司琼原料及制剂中杂质3-吲哚甲酸的检测方法。

背景技术

盐酸托烷司琼是高度选择性5-HT受体拮抗剂，适用于预防和治疗癌症化疗、放疗和手术后引起的恶心和呕吐，其结构式为

化学名为内-1H-吲哚-3-羧酸-8-甲基-8-氮杂双环[3.2.1]辛-3-基酯盐酸盐。在合成该化合物过程中，3-吲哚甲酸作为起始底物，通过化学反应合成盐酸托烷司琼，因此可能会由于反应不完全而影响药物的纯度和质量，需对其进行检查。3-吲哚甲酸的结构式为：

对于合成盐酸托烷司琼过程中引入的3-吲哚甲酸，原料与制剂都需要进行质量控制。因此，实现盐酸托烷司琼及3-吲哚甲酸的分离在合成与制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。

在已有技术中，欧洲药典(07版)收载的有关盐酸托烷司琼原料的检测方法，在“有关物质”的控制中，在HPLC法下采用同一色谱条件，杂质对照品法和主成分自身对照法同时控制“3-吲哚甲酸”和未知的降解产物。但是，经实验发现，该方法在对“3-吲哚甲酸”的检查上，存在着专属性不足的问题。因“3-吲哚甲酸”的强极性，在该色谱条件下出峰较早，导致溶剂峰与3-吲哚甲酸峰重合，且该色谱条件用于盐酸托烷司琼注射液中“3-吲哚甲酸”检查时，问题更为突出，溶剂峰、辅料峰、3-吲哚甲酸峰均有部分重合。因此，该色谱条件不能够对“3-吲哚甲酸”准确定量。对于盐酸托烷司琼制剂中3-吲哚甲酸的检测方法，仅检测，国内外还未见文献报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明所要解决的问题是：提供一种准确地检测盐酸托烷司琼原料及制剂中3-吲哚甲酸含量的方法，从而保证盐酸托烷司琼的药品质量。

所述的盐酸托烷司琼原料及制剂中杂质3-吲哚甲酸的检测方法，包括如下步骤：

(1)取盐酸托烷司琼原料或制剂，用初始流动相溶解并稀释定容，配制每1ml中含盐酸托烷司琼0.5mg的溶液，以托烷司琼计，作为供试品溶液；

(2)取3-吲哚甲酸对照品，加初始流动相溶解并稀释定容，配制每1ml中含0.5μg的溶液，作为对照品溶液；

(3)取步骤(1)中制备的供试品溶液与步骤(2)中制备的对照品溶液各50μl分别注入高效液相色谱仪，进行梯度洗脱；

其中：

色谱柱：C18；

柱温：20～45℃；

流动相流速：0.9～1.1ml/min；

检测波长：280nm；

进样体积：50μl；

流动相：流动相A与流动相B的混合物，流动相A是0.02mol/L的乙酸铵溶液，流动相B是甲醇，初始流动相中，流动相A与流动相B的体积百分比为92∶8～82∶18；

梯度洗脱：0～30min流动相B的体积百分比由0min时的8～18％均匀增加至30min时的45％；30～40min流动相B的体积百分比维持45％；40～50min流动相B的体积百分比由40min时的45％均匀降低为50min时的8～18％；50～55min流动相B的体积百分比维持50min时的体积百分比。

所述的柱温优选25～35℃。

所述的流动相流速优选1.0ml/min。

所述的色谱柱的尺寸只影响出峰的时间，所以对色谱柱的尺寸要求不严格，尺寸优选250mm×4.6mm。

所述的初始流动相中，流动相A与流动相B的体积百分比优选92∶8。

所述的高效液相色谱仪优选：日本岛津LC-20AT，SPD-20A或美国安捷伦1200型，DAD检测器；其他品牌及型号的高效液相色谱仪也可以。

本发明涉及的盐酸托烷司琼原料及制剂的杂质中3-吲哚甲酸的检测方法，是采用高效液相色谱法分析盐酸托烷司琼的纯度及分离3-吲哚甲酸，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，以0.02mol/L的乙酸铵溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，进行梯度洗脱。根据对照品溶液和供试品溶液中的出峰时间确定3-吲哚甲酸存在，根据3-吲哚甲酸的出峰面积，确定供试品溶液中3-吲哚甲酸的含量。

本发明的有益效果如下：

本发明涉及的托烷司琼原料及制剂杂质3-吲哚甲酸的检测方法具有专属性强、定量准确、灵敏度高、方法稳定的特点，具体如下：

(1)专属性强：在现有技术中，对盐酸托烷司琼原料及制剂中杂质的检测是综合在“相关物质”中检测的，其方法是针对多种杂质的检测，而本发明是针对3-吲哚甲酸单种物质的检测，排除了检测过程中其它杂质的干扰；