[发明专利]一种嗜酸乳杆菌抗冻培养基及其应用方法

权利要求书

1.一种嗜酸乳杆菌抗冻培养基，其特征在于：该抗冻培养基的配方组成包括以下组分：16-20g葡萄糖、0.4-0.8g蒺藜多糖、3-5g酵母提取物、4-6g氯化钠、0.3-0.5g甘露醇、0.8-1.2g谷氨酸钠，8-12g大豆蛋白胨、0.5-2.0g柠檬酸氢二铵、0.2-0.5g甜菜碱、1.0-2.5g磷酸氢二钾、0.1-0.2g MgSO₄、0.5-1.0ml吐温80和1000ml蒸馏水。

2.根据权利要求1所述一种嗜酸乳杆菌抗冻培养基，其特征在于：所述抗冻培养基的配方组成包括以下组分：18g葡萄糖、0.5g蒺藜多糖、3.5g酵母提取物、5.0g氯化钠、0.35g甘露醇、1.0g谷氨酸钠，9.0g大豆蛋白胨、1.5g柠檬酸氢二铵、0.4g甜菜碱、1.5g磷酸氢二钾、0.1gMgSO₄、0.8ml吐温80和1000ml蒸馏水。

3.根据权利要求1所述一种嗜酸乳杆菌抗冻培养基，其特征在于：所述抗冻培养基的配方组成包括以下组分：20g葡萄糖、0.5g蒺藜多糖、4.5g酵母提取物、4.0g氯化钠、0.4g甘露醇、1.2g谷氨酸钠，8.0g大豆蛋白胨、2.0g柠檬酸氢二铵、0.5g甜菜碱、1.5g磷酸氢二钾、0.1gMgSO₄、1.0ml吐温80和1000ml蒸馏水。

4.根据权利要求1、2或3所述一种嗜酸乳杆菌抗冻培养基，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌抗冻培养基的制备方法，包括以下步骤：

(1)将称取的谷氨酸钠、甜菜碱和甘露醇溶解于50mL蒸馏水中，然后用0.22μm滤膜过滤除菌得滤液；

(2)向950mL蒸馏水中加入称取的葡萄糖、蒺藜多糖、酵母提取物、氯化钠、大豆蛋白胨、柠檬酸氢二铵、磷酸氢二钾、MgSO₄和吐温80，加热溶解，调节pH至5.6-6.0，然后于118-121℃灭菌15-20min，灭菌后冷却至室温得培养基A；

(3)将滤液与培养基A混合均匀，得嗜酸乳杆菌抗冻培养基。

5.一种如权利要求1所述嗜酸乳杆菌抗冻培养基的应用方法，其特征在于：包括以下步骤：

将活化的嗜酸乳杆菌按5％的接种量接入嗜酸乳杆菌抗冻培养基中于37℃培养16-18h，然后在6000rpm离心10-15min，得嗜酸乳杆菌菌泥，向菌泥中加入脱脂奶粉、核黄素和磷酸缓冲液，每克菌泥中加入0.2g脱脂奶粉、0.006g核黄素和0.8ml pH6.8的磷酸缓冲液，混合均匀后于-40℃预冻3-12h，然后放入冻干机中于-56℃、4-6Pa下进行冷冻干燥18-24h，得嗜酸乳杆菌菌粉。