[发明专利]利用未萌发玉米种子转化外源基因的方法

权利要求书

1.一种利用未萌发玉米种子转化外源基因的方法，其特征是采用如下步骤完成：

(1)玉米种子转化前处理：将玉米种子在蒸馏水中浸泡1-2天，选择玉米种子胚位置钻孔，孔径为1.5-2.5毫米，孔深为2-3毫米，使玉米种子中胚芽位置暴露，并造成生长点位置的轻度损伤；

(2)农杆菌侵染：取6-8微升农杆菌液滴入孔中，静置5分钟，在0.05MPa条件下进行负压处理10分钟，负压处理重复三次后，再在孔中滴入6-8微升菌液，封闭孔口；

(3)种植及养护：侵染后的玉米种子，正常种植于土中；

(4)鉴定转基因植株。

2.根据权利要求1所述的利用未萌发玉米种子转化外源基因的方法，其特征于：选择玉米种子胚中轴线上约四分之一位置钻孔，此部位有一小突起，作为钻孔位置的参照。

3.根据权利要求1所述的利用未萌发玉米种子转化外源基因的方法，其特征于：农杆菌液是将带有抗除草剂基因的农杆菌在YEB培养基中常规振荡培养，当OD值为0.5-1.0时将菌液离心，弃去YEB培养液，换用N6培养液重新悬浮活化培养，当达到对数生长期时进行侵染。