[发明专利]一种双功能肽修饰的基因载体及其制备方法无效

专利信息
申请号: 201110372844.5 申请日: 2011-11-22
公开(公告)号: CN102399267A 公开(公告)日: 2012-04-04
发明(设计)人: 刘克海;朱青;高申;王晓宇 申请(专利权)人: 上海海洋大学
主分类号: C07K7/08 分类号: C07K7/08;C12N15/63;C08G81/00
代理公司: 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 代理人: 巫蓓丽
地址: 201306 上海市*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 功能 修饰 基因 载体 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种双功能肽,其特征在于,所述的双功能肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种基因载体,其特征在于,它被如权利要求1所述的双功能肽所修饰。

3.根据权利要求2所述的基因载体,其特征在于,它是由双功能肽和聚乙烯亚胺衍生物偶联而成的。

4.根据权利要求3所述的基因载体,其特征在于,所述的聚乙烯亚胺衍生物是普郎尼克修饰的聚乙烯亚胺即普郎尼克P123-聚乙烯亚胺。

5.根据权利要求4所述的基因载体,其特征在于,所述的普郎尼克与聚乙烯亚胺的摩尔比为1:1-1:20,所述的聚乙烯亚胺的分子量范围为600-70000 Da。

6.根据权利要求3或4所述的基因载体,其特征在于,所述的双功能肽与聚乙烯亚胺衍生物的摩尔比为1:1-10:1。

7.一种如权利要求4所述的基因载体的制备方法,其特征在于,它包括以下步骤:

(a)双功能肽的合成:合成如权利要求1所述的双功能肽;

(b)普朗尼克P123-聚乙烯亚胺的制备:将活化后的普郎尼克P123和除水后的聚乙烯亚胺分别溶于无水二氯甲烷,再将所得的两液同时加入无水二氯甲烷底液,氮气饱和后磁力搅拌过夜,离心取上清,将所述的上清旋转蒸发;

(c)双功能肽对普朗尼克P123-聚乙烯亚胺的修饰:表面活性剂溶解于二甲基亚砜,步骤(a)所述的双功能肽和步骤(b)所述的普朗尼克P123-聚乙烯亚胺分别溶解于PBS溶液;表面活性剂溶液加入到普朗尼克P123-聚乙烯亚胺液得到maleimided Plu-PEI液;双功能肽液加入到所述的maleimided Plu-PEI液,反应过夜,离心冻干。

8.一种如权利要求2或3所述的基因载体与DNA形成的复合物。

9.根据权利要求8所述的复合物,其特征在于,所述的DNA含报告基因、抗癌基因和/或细胞因子基因。

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