[发明专利]大果红花油茶组织培养快速繁殖的育苗方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种珍稀食用植物油种苗繁育方法，具体地说，涉及一种大果红花油茶的组织培养快速繁殖的育苗方法。

背景技术

大果红花油茶属山茶科山茶属，为常绿小乔木，每年12月至次年3月开花，花果大，是生产食用油、观赏植物和荒山绿化的优良树种；秋季采果榨油。

大果红花油茶经济价值大，全树是宝。油茶果实，是由果壳、种壳、种仁组成，比例为63.64∶14.38∶21.98，单果重在0.5～1.5公斤，干籽出油率在50～62％，树木叶片大而厚常绿，有利于涵养水源、保护生态环境。果壳可提取栲胶，制糠醛、碳酸钾、活性炭、木糠醇等，还可以与锯木屑搭配可做成食用菌培养基质。茶饼是油茶籽加工后的残渣，可提取粗茶油，提皂素，还应用于医药、农药、化肥、有机肥、饲料。茶油是天然木本油料之一，生长于野外山地，可不施任何化肥农药，不含普通茶油中的芥酸，不含豆油、花生油中的黄曲霉素、不含动物油中的高胆固醇，属纯天然绿色食品。精制茶油已被国内外营养学界、医疗界广泛公认富含油酸和亚油酸，富含多种氨基酸和维生素，对肝炎、高血压、肥胖症、心脑血管、动脉硬化、哮喘、胃溃疡等疾病具有疗效，长期食用有提高人体机能、延年益寿等功效，被誉为“油中之王”，成为最新的高级烹调食用油。是食、药并用的保健佳品。

由于普通油茶分布范围广，油茶果小，结实率低，出油低，多含多酚、芥酸等不良物质；传统繁殖方法用实生苗和嫁接苗，育苗时间要2～3年，开花挂果投产慢，实生苗要种植10～15年才能开花挂果，嫁接苗也要6～7年才开花挂果。采用藤县天平镇罗漫村大果红花油茶原种源(原产地)作外植体进行组织细胞培养，培育成小苗，再培育成可移栽的中苗，本方法具有繁殖快，增殖达3倍以上，3～8个月可以成苗；移栽成活率高；基因不变异，能保持原来品种的优良性状；开花挂果快；出油高，油质优；丰产期长等特点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种通过组织培养技术可以脱除多种植物病毒，避免病毒引起的品种退化和减产造成的损失，使原来的优良种性得到保持；繁殖快且量大、成苗快、种苗品质好、移栽成活率高，品种遗传物质变异小，开花挂果快、出油高、油质优、丰产期长的大果红花油茶的种苗繁殖方法。

本发明人通过选定的大果红花油茶树芽苞和叶片作为外植体，经消毒去掉杂质，将芽尖组织和叶片放在分化培养基上进行无菌培育成小植株，将诱导出的小植株切割后接入新的分化培养基中，多次继代采用分化培养，结果丛生芽数量多，生长快。再转移到壮苗培养基上培养，形成袋装苗，经过自然光照下炼苗后出袋栽培，移栽到营养杯中育中苗，成活率达到98％以上。经十三年摸索筛选，由于靠本发明人利用了培养基上培养出壮苗，终于找到适合细胞分化，壮苗的培养基作为发明点，从而实现了本发明。

本发明的大果红花油茶组织培养快速繁殖的育苗方法，包括以下技术工艺步骤：

1、一种大果红花油茶组织培养快速繁殖的育苗方法，其特征在于：采用大果红花油茶树芽苞和叶片作为外植体，消毒，配制分化培养基，壮苗培养基，用定向聚丙烯薄膜袋作为培养皿器，接种，培养，其技术工艺步骤如下，

(1)采外植体，选定大果红花油茶树的嫩枝条剪下，连芽和叶片保湿保鲜采集，选取芽苞和嫩叶放清水冲洗，然后用饱和洗衣粉水清洗，再用流动的清水漂洗2～5分钟，

(2)无菌分化，把漂洗干净的油茶树芽苞或嫩叶片作为外植体，在无菌接种室工作台上用72％～75％的酒精消毒10～15秒后，用无菌水冲洗2～5次后置于0.1％～0.2％的升汞中消毒8～15分钟，再用无菌水漂洗4～6次，去掉外表杂物。把所消毒的芽苞、叶片放到150倍以上的电子显微镜下，用解剖刀切割外表的杂物，清理外表杂物后取下最顶的芽尖0.2～0.25mm组织，用接种针接种到分化培养基上培养15～20天得到小植株，所述的分化培养基每升含椰子汁50～150ml，蔗糖15～45g，卡拉胶6～10g，肌醇50～150mg，甘氨酸1～3mg，烟酸0.1～0.35mg，D-泛酸钙0.1～0.54mg，吡哆辛盐酸0.2～3.5mg，生长素0.09～0.25mg，分裂素6BA0.1～0.3mg，羟烯腺嘌呤0.1～0.3mg，烯腺嘌呤0.01～0.03mg，其余为MS培养基中的1/2大量元素和微量元素成分，

(3)快速增殖，培养15～20天后，将诱导出的小植株切割成0.3～0.5mm后接入新的分化培养基中，多次继代采用分化培养基，在每次转袋过程中，不断淘汰白化苗和污染袋苗，剪除枯黄叶片，经3～5次转袋培养后，得到的小植株再进行壮苗培养，