[发明专利]酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鹅去氧胆酸的制备方法，尤其涉及酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法。

背景技术

鹅去氧胆酸(简称CDCA)是存在于动物胆汁中的一种重要的生化物质，也是动物胆汁的有效成分之一。具有治疗胆固醇型结石、抗菌、抗炎、抗过敏、解热、化痰、平喘等药理作用，还是合成昂贵的熊去氧胆酸主要的原料。

目前CDCA的获得主要是以胆酸(CA)为原料加以合成的方法和在胆汁中(禽类胆汁和猪胆汁)提取的方法两大类，1、利用合成方法获得CDCA时步骤繁琐，反应条件要求苛刻，不利于工业化批量生产；2、利用提取方法获得CDCA时，主要是利用钡盐和钙盐沉淀法，利用钡盐直接对人类赖以生存的自然环境带来严重的威胁，利用钙盐则使用大量的水，极大的浪费水资源，且两种提取方法所得产品含量较低，一般均低于90％。

而当前的工业化生产急需一种操作简单，安全环保，提取CDCA含量大于等于98％鹅去氧胆酸的方法，但目前此种方法未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供以酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法，该方法可以投入工业化生产，操作简单、安全环保。

为达到上述目的，本发明采用方法如下：

一、酯化：将提取过胆红素和猪去氧胆酸的母液旋转蒸发至膏状物，加3-5倍量的甲醇，4％的浓硫酸，使之完全溶解，常温静置10-12h后，加氢氧化钠调pH至6.0-7.0，静置1-2h，抽滤，滤液减压浓缩，设置压力0.05-0.07MPa，设置温度40-45℃，回收甲醇，得到酯化膏状物；

二、酰化：向步骤一所得酯化膏状物中加入1.0-1.5倍量的乙酸酐，加热搅拌回流1-3h，静置，减压浓缩，设置压力0.08-0.1Mpa，设置温度90-95℃，回收乙酸酐，得到酰化膏状物；

三、石油醚萃取：向步骤二所得酰化膏状物中加入2-4倍量的石油醚和1-2倍量的水，加热搅拌回流1.0h，静置，弃去下水层，石油醚层水洗至pH值为5-7，50℃保温4h，30℃保温2h，过滤，滤液减压浓缩，设置压力0.06-0.08Mpa，设置温度70-80℃，回收石油醚，得到萃取膏状物；

四、一次结晶：向步骤三所得萃取膏状物中加入2-3倍量的90％-95％的乙醇，静置结晶24h，抽滤，晶体60℃以下真空干燥，得到一次结晶体；

五、二次结晶：向上述一次结晶体中加入1-2倍量的石油醚，加热使之完全溶解，静置冷却结晶2-5h，抽滤，晶体干燥；

六、水解酸化：称取干燥后的晶体加入1-2倍量的氢氧化钠，8-10倍量的纯化水，加热皂化12h以上，冷却至室温静置分层，取下层加少量纯化水使之溶解，盐酸酸化调pH至4-5，过滤既得粗品鹅去氧胆酸；

七、结晶：向上述粗品鹅去氧胆酸中加入10-12倍量的乙酸乙酯和5％-10％活性炭，加热回流30min-60min，过滤，水洗至中性，滤液减压浓缩，设置压力0.040.06MPa，设置温度45-50℃，回收乙酸乙酯，回收后体积至原体积的1/8-1/4，冷却至室温，静置结晶，过滤既得精品；

八、干燥：将上述晶体放入真空干燥箱干燥，设置干燥箱内温度60℃，既得精品鹅去氧胆酸。

本发明的有益之处在于：利用本发明方法制备鹅去氧胆酸，制备方法简单，安全环保，利用大规模工业化生产；此方法所提取鹅去氧胆酸含量大于等于98％，提取比率高，能满足市场对该产品的纯度要求。

具体实施方式

实施例1

酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法，步骤如下：

实验室小试，一、酯化：取提过胆红素和猪去氧胆酸的膏状物0.1kg放入实验器皿内，加3倍量的甲醇，4ml的浓硫酸，使之完全溶解，常温静置10h后，加氢氧化钠调pH至7.0，静置1h，抽滤，将滤液放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0.05Mpa，设定温度45℃，循环水冷却回收甲醇，得到酯化膏状物；

二、酰化：将步骤一所得酯化膏状物取出，装入器皿，加入1.0倍量的乙酸酐，加热搅拌回流1h，静置，将液体放入旋转蒸发仪内，设定旋转蒸发仪真空度0.08Mpa，设定温度95℃，循环水冷却回收乙酸酐，得到酰化膏状物；