[发明专利]一种利用广西金线莲蒴果快速繁育其种苗的方法

权利要求书

1.一种利用广西金线莲蒴果快速繁育其种苗的方法，包括如下步骤：

（1）蒴果成熟度的选择：将野外采集的金线莲植株引种在人工资源圃内，于花期选择优良株系进行人工授粉和果实培育，金线莲蒴果在成熟过程中，内部种胚的颜色由乳白色浆状逐渐转变成金黄色的丝状，其中以人工授粉后生长120~150天的未开裂蒴果为最佳材料；

（2）种子的萌发培养：将选取的蒴果材料经外表灭菌处理后，取出内部的种胚，均匀的撒播到萌发培养基上，在温度24~28℃、光照强度20μmol·m^-2·s^-1、光照时间12 h/d的条件下，培养25天后，种子萌发形成原球茎；

（3）原球茎的分化：将播种后形成的原球茎及时转入分化培养基中，在温度24~28℃、光照强度30 μmol·m^-2·s^-1、光照时间12 h/d的条件下，培养20~30天，原球茎分化形成带叶的芽苗；

（4）分化苗的增殖及壮苗培养: 将原球茎分化的幼嫩芽苗转入转接到增殖及壮苗培养基里，在温度24~28℃、光照强度40μmol·m^-2·s^-1、光照时间12 h/d的条件下，培养约30天可培养出4~6cm高的健壮大苗；

（5）生根培养: 经已分化的广西金线莲芽苗转接到生根培养基上，在温度24~28℃、光照强度40μmol·m^-2·s^-1、光照时间12 h/d的条件下，培养约35天可培养出5cm高以上根系发达的完整大苗；

（6）驯化及移栽：经过生根培养的健壮大苗，待根系生长发达后，便可进行出瓶移栽；出瓶前，将试管苗转移到温室大棚内炼苗15~20天，然后将试管苗从瓶中取出，小心地将根部附着的培养基洗净，待植株表面水分稍干便可种植，腐殖土或塘泥均可作为移栽基质，移栽后保持温度为22~28℃，湿度为75% ~80%，成活率达到95％以上。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（2）中所述萌发培养基为MS+AC1.0g/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L，pH为5.8。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（3）中所述原球茎分化培养基为MS+马铃薯汁200g/L +AC1.0g/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L，pH 5.8。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（4）中所述增殖及壮苗培养基为MS+香蕉汁100g/L +AC1.0g/L+蔗糖30g/L+琼脂6.0g/L，pH 5.8。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征是：步骤（5）中所述生根培养基为1/2MS+NAA0.5~1.0mg/L+蔗糖20g/L +琼脂6.0g/L，pH 5.8。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征是：所述消毒是将外植体用在流动的自来水下冲洗干净后，置于超净工作台上用70%的酒精浸泡60s，再用0.1%的HgCl₂消毒8分钟，取出用无菌水浸洗5次，用无菌滤纸吸干材料表面水分后将蒴果纵向剖开，将里面细小的种子取出，均匀的洒在培养基的表面。