[发明专利]一种检测荧光原位杂交质量控制的方法

权利要求书

1.一种荧光原位杂交过程的质量控制方法，其特征在于：载玻片经多聚赖氨酸处理后，设置不同的DNA样品区，将不同DNA样品溶液分别加到其上，风干后经紫外交联仪照射，使DNA结合到玻片上，得到简化的染色体片，而后进行免疫检测，通过不同区域信号的反应得出荧光原位杂交过程的质量反馈。

2.按权利要求1所述的荧光原位杂交过程的质量控制方法，其特征在于：载玻片经多聚赖氨酸处理后，分别设置待测DNA样品(T)、阳性对照(P)、阴性对照(N)不同的DNA样品区，将不同DNA样品溶液分别加到其上，风干后用紫外交联仪照射达450mJoule，使DNA结合到玻片上，得到简化的染色体片，而后进行免疫检测，即可分别从检测探针质量、免疫检测以及杂交流程方面得到相应的质量信息。

3.按权利要求1所述的荧光原位杂交过程的质量控制方法，其特征在于：针对探针质量和免疫检测实验中得到的结果和对策：

A.标记的探针DNA样品(T)和阳性对照(P)位置上显示明亮的荧光信号，未标记的DNA阴性对照(N)位置无信号时，即荧光原位杂交过程中探针质量与免疫检测条件正常；

B.阳性对照(P)显示信号，待测DNA样品(T)和阴性对照(N)无信号时，即荧光原位杂交过程中探针标记失败；需重新合成探针；

C.待测DNA样品(T)、阳性对照(P)、阴性对照(N)均不显示信号时，即荧光原位杂交过程中抗体失活或其他免疫检测条件不合适；需重新制备抗体或检查免疫检测条件；

D.待测DNA样品(T)、阳性对照(P)、阴性对照(N)均显示信号，即荧光原位杂交过程中抗体发生非特异性吸附；采取的措施为降低抗体浓度、加大洗脱强度、更换抗体所用缓冲液或更换整个抗体体系。

4.按权利要求1所述的荧光原位杂交过程的质量控制方法，其特征在于：针对杂交流程的检测实验中得到的结果和对策：

A.与探针序列同源的DNA样品处(T)(P)获得了明亮的信号，无关DNA样品(N)处则无信号时，即荧光原位杂交过程中杂交的流程正常；

B.阳性对照(P)显示信号，已知包含探针序列的模板样品(T)和阴性对照(N)无信号时，即荧光原位杂交过程中杂交的流程异常；需提高探针浓度或调节杂交及洗脱条件；

C.阳性对照(P)显示信号、已知包含探针序列的模板样品(T)和阴性对照(N)均不显示信号时，即荧光原位杂交过程中表示抗体失活或免疫检测条件不合适；需重新制备抗体或采用更加宽松的杂交及洗脱条件；

D.阳性对照(P)显示信号、已知包含探针序列的模板样品(T)和阴性对照(N)均显示信号，即荧光原位杂交过程中出现非特异性杂交；需降低探针浓度或采取更加严谨的杂交及洗脱条件。

5.按权利要求1所述的荧光原位杂交过程的质量控制方法，其特征在于：所述检测荧光原位杂交质量的方法可以适用于RNA探针及酶标抗体、组织原位杂交或整装原位杂交中。