[发明专利]猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、伪狂犬病的三联活疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于兽用生物制品技术领域，更具体是涉及一种制备猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、伪狂犬病三联疫苗及其制备方法。

背景技术

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine productive and respiratory syndrome virus，PRRSV)引起的猪的一种高度传染病，该病主要侵害繁殖系统，以发热、厌食、流产、木乃伊胎、死胎、弱仔以及仔猪的呼吸症状和高死亡率为特征的高度传染性病毒病。目前该病在世界各养猪国家均流行，在中国的流行和分布也越来越广泛，危害也日益严重。

伪狂犬病(Pseudorabies，PR)是由伪狂犬病病毒(PRvirus，PRV)引起多种家畜和野生动物的一种重要传染病。猪是PRV的唯一自然宿主，临床以仔猪的神经症状，严重的呼吸道疾病以及母猪发生流产、死胎和产仔数下降等症状为特征，耐过猪增重减慢。我国自1947年首次发现本病，现至少有18个省、市、自治区(包括台湾和香港)都有本病的发生，给畜牧业特别是养猪业造成了巨大的经济损失。

猪瘟(classical swine fever，CSF)是由猪瘟病毒(classical swine fever virus，CSFV)引起的一种以稽留高热、出血和高死亡率为主要特征的高度接触性传染病，本病主要通过消化道、呼吸道、黏膜和伤口进行水平传播，也可通过胎盘进行垂直传播，各个日龄的猪均可感染发病，是严重威胁养猪业的烈性传染病。

这三种病是危害我国养猪业发展的十分重要的传染病。我国主要采取疫苗免疫的方法来预防这三种烈性传染病的暴发与流行。目前，市场上有许多种类的猪用单苗，但是它们均存在免疫程序繁琐，成本高，费时费力等缺点，直接影响了这三种疾病的预防效果。另外，由于猪繁殖与呼吸综合征病毒会降低猪的免疫力(如，通过破坏肺泡巨噬细胞的正常功能)并引发免疫抑制(见，例如，庞海洋等，第三届猪病防控学术研讨会会议论文集，第262-265页，2008年)，所以，即使将猪繁殖与呼吸综合征疫苗与其他疫苗联合免疫，也难以实现与单苗免疫相当的效果。因此，本领域迫切需要一种技术方案，提高对猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病和猪瘟的免疫效果，同时简化单苗多次免疫的繁琐的程序。

发明内容

在一方面，本发明提供了一种疫苗组合物，其含有猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗、猪瘟疫苗与猪伪狂犬疫苗。在某些实施方式中，所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗、猪瘟疫苗与猪伪狂犬疫苗之间基本上无免疫抑制。

在某些实施方式中，所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗、所述猪瘟疫苗及所述伪狂犬病疫苗的混合比例为1∶4∶1。

在某些实施方式中，所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗含有Nsp1核苷酸序列，所述序列的编码序列与SEQ ID NO：1具有至少90％的同源性。在某些实施方式中，所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗进一步含有Nsp2核苷酸序列，所述Nsp2核苷酸的编码序列与SEQ ID NO：2具有至少90％的同源性。

在某些实施方式中，所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗含有由SEQ ID NO：1编码的Nsp1核苷酸序列，且含有由SEQ ID NO：2编码的Nsp2核苷酸序列。

在某些实施方式中，所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗含有猪繁殖与呼吸综合征病毒的核苷酸序列，该序列的编码序列与SEQ ID NO：3具有至少90％的同源性。

在某些实施方式中，所述猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗含有猪繁殖与呼吸综合征病毒的核苷酸序列，该序列由SEQ ID NO：3编码。

在某些实施方式中，所述猪瘟疫苗的编码序列与SEQ ID NO：9具有至少80％的同源性。在某些实施方式中，所述猪瘟疫苗的编码序列如SEQ ID NO：9所示。

在某些实施方式中，所述伪狂犬病疫苗编码序列与NCBI参考号NC_006151的核苷酸序列至少具有80％的同源性。在某些实施方式中，所述伪狂犬病疫苗编码序列如NCBI参考号NC_006151的核苷酸序列所示。

在另一方面，本发明提供了一种制备所述疫苗组合物的方法，以及用该方法制备得到的疫苗组合物，其含有猪繁殖与呼吸综合征病毒疫苗、猪瘟疫苗和猪伪狂犬疫苗。

本发明还提供了所述疫苗组合物在制备预防或治疗猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟与猪伪狂犬病的生物制品中的用途。