[发明专利]草莓的茎尖离体快速培养方法无效
| 申请号: | 201110327423.0 | 申请日: | 2011-10-25 |
| 公开(公告)号: | CN102422816A | 公开(公告)日: | 2012-04-25 |
| 发明(设计)人: | 张媁;胡海峰 | 申请(专利权)人: | 上海航育种子基地场 |
| 主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹 |
| 地址: | 201109 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 草莓 茎尖离体 快速 培养 方法 | ||
1.一种草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,具体步骤为:
第一步:选取草莓当年萌发的匍匐茎,冲洗干净,消毒备用;
第二步:将消毒干净的草莓匍匐茎在解剖镜下切取0.1~0.5mm长的茎尖,接种于发生培养基中进行生芽培养,待茎尖上长出0.5~1.5cm长的新芽后,将新芽切下,接种到增殖培养基中进行丛生芽诱导,其中,所述发生培养基是在MS培养基的基础上添加了6-苄基氨基嘌呤和萘乙酸,所述增殖培养基是在MS培养基的基础上添加了6-苄基氨基嘌呤、激动素和吲哚丁酸;
第三步:将丛生芽切成单芽,接种于生根培养基中进行生根培养,所述生根培养基是在1/2MS培养基的基础上添加了萘乙酸;
第四步,将生根的试管苗移入由质量比为4~6:1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中,浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿,5~9天后揭开薄膜逐步炼苗,每天叶面喷水2~3次,10~20天后施加肥料液,50~70天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘,浇水后用塑料薄膜覆盖保温保湿,经1.5~2.5个月培养后直接移栽至大田中。
2.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述第一步中的消毒的具体操作为:在超净工作台上先用70~80vol%乙醇溶液消毒,然后用0.05~0.15vol%的洁尔敏溶液消毒,最后用0.05~0.15vol%氯化汞溶液消毒,用无菌水冲洗,再用无菌滤纸吸干水分。
3.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述发生培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为1~3mg/L,萘乙酸的浓度为0.1~0.3mg/L,pH值为5~6。
4.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述增殖培养基中6-苄基氨基嘌呤的浓度为0.1~1.0mg/L,激动素的浓度为0.1~0.3mg/L,吲哚丁酸的浓度为0.1~0.3mg/L。
5.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述生根培养基中萘乙酸的浓度为0.1~1.0mg/L。
6.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述第二步中生芽培养是在20~30℃、光照强度2000~3000LX以及光照时间8~16小时/天的条件下进行。
7.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述第二步中丛生芽诱导是在20~30℃、光照强度3000~4000LX以及光照时间8~16小时/天的条件下进行。
8.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述第三步中生根培养是在20~30℃、光照强度3000~4000LX,光照时间8~16小时/天的条件下进行。
9.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述第二步进行丛生芽诱导后进行继代增殖,每30-35天增殖一次,增殖率为1:3-4。
10.如权利要求1所述的草莓的茎尖离体快速培养方法,其特征在于,所述第四步中用到的肥料液中含有0.05~0.15wt%硝酸铵和0.05~0.15wt%磷酸二氢钾。
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