[发明专利]一种生产高手性纯度的阿托伐他汀钙的新方法

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种生产高手性纯度的如式9所示的阿托伐他汀钙的侧链A9的方法，该侧链A9用于制备阿托伐他汀钙。

背景技术

阿托伐他汀钙是由柏克-戴维斯公司(华纳-兰伯特分公司)研制，并与辉瑞公司联合销售的他汀类血脂调节药。阿托伐他汀钙属于一种竞争性、选择性HMG-CoA还原酶抑制剂，能阻断HMG-CoA还原成羟甲戊酸，从而大大降低总胆固醇和低密度脂蛋白的含量。

阿托伐他汀钙分子结构上存在两个手性中心，存在四种立体构型，其中如式10所示的立体构型，即(3R，5R)-7-[2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯胺基甲酰基)吡咯-1-基]-3，5-二羟基庚酸钙盐是活性成分，其它三种构型，即(3R，5S)-7-[2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯胺基甲酰基)吡咯-1-基]-3，5-二羟基庚酸钙盐、(3S，5R)-7-[2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯胺基甲酰基)吡咯-1-基]-3，5-二羟基庚酸钙盐和(3S，5S)-7-[2-(4-氟苯基)-5-异丙基-3-苯基-4-(苯胺基甲酰基)吡咯-1-基]-3，5-二羟基庚酸钙盐是杂质，由于它们的结构非常接近，给活性成分的测定分析带来了很大的困难，也影响了产物阿托伐他汀钙的手性纯度。

在现有技术中合成阿托伐他汀钙过程中的手性主要是由如式9所示的化合物，即2-((4R，6R)-6-(2-氨乙基)-2，2-二甲基-1，3-二氧六环-4-基)-乙酸叔丁酯，带来的。因此，如果能找到一种生产高纯度的化合物9的方法，对于生产高手性纯度的阿托伐他汀钙钙，具有重要的意义。

生物催化的特殊性使得其受到企业界和科研工作者的重视，特别是其高选择性和反应条件温和，特别适合于很多化学药物的手性中间体制备。可以降低化学反应中很多步骤如保护去保护等等。但是，在生物催化中很多转化需要纯酶来进行催化，否则就会产生催化效果不佳，杂质多等弊端。

在WO 2006/134482中，2-脱氧-D-核糖-5-磷酸醛缩酶(DERA)催化的醛醇(Aldol)加成步骤包括在一种生成阿托伐他汀钙的方法中。但催化剂是纯酶，存在成本很高和底物对酶有活性毒性的问题，限制了其工业应用。

由2-脱氧核糖-5-磷酸醛缩酶(DERA)催化的三种醛底物的立体特异性醛醇缩合反应并非平等地接受所有的取代乙醛作为DERA的底物(Am.Chem.Soc；117，29，(1995)第7585页)，并且某些底物对DERA活性显示出抑制作用。所述酶催化的反应时间为6天。

在WO2007/039287A1中，描述了一种经由碘代内酯合成的内酯化他汀侧链中间体的合成，其需要6个有机合成步骤。在该多步骤合成中，第4步为确定所述碘代内酯中间产物的立体化学的内酯形成步骤。该内酯形成步骤仅提供了相对低的立体选择性。以化学计算量使用的一些试剂如I-化合物、Ag-化合物、格氏(Grignard)试剂以及对映体纯起始化合物是相当昂贵的。所述6个步骤的有机合成(如下所示)得到19％总收率。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明开发了一种新的高手性纯度的阿托伐他汀钙化合物的侧链A9的制备工艺，通过全细胞转化底物获得高手性纯度的中间体4，由中间体化合物4经过数步反应制备得到侧链化合物9。从而制备得到高手性纯度的阿托伐他汀钙。本发明的阿托伐他汀钙化合物的侧链A9的制备方法，克服了现有技术存在的不足，生产成本低，得到的A9具有极高的光学纯度(大于99.5％)，从而可制备得到极高光学纯度的阿托伐他汀钙。

使用醛缩酶过表达的生物体作为全细胞催化剂的可能性使得与Proc.Nat.Acad.Sci.USA 2004，101(16)5788-5793中所描述的方法相比降低了生产成本，因为省去了酶制备以及产物纯化中的数个步骤。此外，与其他酶制品相比，细胞环境的稳定作用允许使用更高底物浓度，因为对酶活性具有更低影响。这就使得能够以更低的酶载量实现更高的体积产率，其显著降低了生产成本。令人惊讶地，使用醛缩酶过表达的生物体作为全细胞催化剂，保持了式4的化合物的高对映体和非对映体过量。