[发明专利]一种低糖化突变体干扰素-λ1、其表达、纯化方法及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域中的蛋白质及其表达、纯化方法，特别是涉及一种具有生物活性的低糖化突变体干扰素-λ1(IFN-λ1)及其表达、纯化方法与之抗肿瘤细胞增殖的作用。

背景技术

IFN-λs是最新发现的一类具有抗病毒活性的干扰素样细胞因子，包括IFN-λ1(IL-29)、IFN-λ2(IL-28A)和IFN-λ3(IL-28B)。IFN-λs在基因结构上与IL-10家族十分相似，而在氨基酸组成和功能方面与I型IFN更为接近，在IL-10家族和I型IFN之间建立了进化上的联系。IFN-λs，尤其是IFN-λ1，具有开发成广谱抗病毒药物、抗肿瘤药物及增强免疫力药物的潜在价值。

干扰素(interferon，IFN)是人类最早认识的细胞因子，早在1957年Isaacs和Lindenmann就从感染流感病毒的鸡胚中发现了一种具有抗病毒活性的蛋白质，将其称之为interferon并一直沿用至今[Isaacs A.& lindenmann J.(1957)Virus interference.I.The interferon.Proc R Soc Lond B Biol Sci.147(927)：258-267]。在那以后的许多年里，干扰素只是作为病毒复制的抑制物而为人所知。后来，越来越多的证据表明IFNs实际上是一类多效因子，除了具有强大的广谱抗病毒活性，还具有抑制细胞增殖、调节细胞分化和免疫调节等多种功能。人类IFNs包括I型IFN家族和II型IFN家族，以及一个新发现的IFN-λs家族。II型IFN家族仅有IFN-γ一个成员，基因位于12号染色体，IFN-γ与受体IFN-γR结合，其功能主要是免疫调节。I型IFN家族包括至少13种IFN-α非等位基因，编码13种亚型的IFN-α，1个IFN-β基因，1个IFN-ω基因，各编码一种IFN，以及了解尚少的IFN-κ和IFN-ε[Lafleur D.W.，Nardelli B.，Tsareva T.，Mather D.，Feng P.，Semenuk M.，Taylor K.，Buergin M.，Chinchilla D.，Roshke V.，Chen G.，Ruben S.M.，Pitha P.M.，Coleman T.A.& Moore P.A.(2001)Interferon-kappa，a novel type I interferon expressed in human keratinocytes.J Biol Chem.276(43)：39765-39771]。所有I型IFN基因均位于9号染色体，没有内含子，并且所编码蛋白全部使用同一种受体IFN-αβR。鼠类有一种称为limitin的I型IFN，现在命名为IFN-ζ，至今在人类还没有发现其对应物[Oritani K.，Medina K.L.，Tomiyama Y.，Ishikawa J.，Okajima Y.，Ogawa M.，Yokota T.，Aoyama K.，Takahashi I.，Kincade P.W.& Matsuzawa Y.(2000)Limitin：An interferon-like cytokine that preferentially influences B-lymphocyte precursors.Nat Med.6(6)：659-666.]。在反刍动物和猪体内还分别存在一种称为滋养层IFN的I型IFN，即IFN-τ和IFN-δ，其功能主要跟这类动物的受孕有关[Kontsek P.，Karayianni-Vasconcelos G.& Kontsekova E.(2003)The human interferon system：characterization and classification after discovery of novel members.Acta Virol.；47(4)：201-215]。