[发明专利]用于检测小苍兰病毒的引物及其检测方法

权利要求书

1.一种用于检测小苍兰病毒的引物，其特征在于：包括针对小苍兰中的黄瓜花叶病毒的外壳蛋白基因设计的黄瓜花叶病毒引物对，针对小苍兰中的小苍兰花叶病毒的外壳蛋白基因设计的小苍兰花叶病毒引物对，以及针对小苍兰中的菜豆黄花叶病毒的外壳蛋白基因设计的菜豆黄花叶病毒引物对；其中，所述各引物对具体为：

(1)黄瓜花叶病毒引物对：黄瓜花叶病毒的正向引物5′-AATCTGAATCAACCAGTGCTGG-3′，黄瓜花叶病毒的反向引物5′-GTGGGAATGCGTTGGTGCTC-3′；

(2)小苍兰花叶病毒引物对：小苍兰花叶病毒的正向引物5′-GACGAGGTGCGATACCAAGCAACC-3′，小苍兰花叶病毒的反向引物5′-GCACTCCATTGAACCAGGCGTC-3′；

(3)菜豆黄花叶病毒引物对：菜豆黄花叶病毒的正向引物5′-AATGTTGGAACAGACGAGGAGA-3′，菜豆黄花叶病毒的反向引物5′-ACCCTGTCAGAGTAGAGAGAATGA-3′。

2.一种利用权利要求1所述的引物检测小苍兰病毒的方法，其特征在于：包括以下反应体系和反应程序：

反应体系：反应体系的总体积为50μL，含有0.3μL 5U/μL的Taq酶、5μL的10×Taq酶buffer、4μL 2.5mmol/L的dNTPs、1μL模板、0.3-0.38μmol/L的黄瓜花叶病毒正向引物、0.3-0.38μmol/L的黄瓜花叶病毒反向引物、0.02-0.04μmol/L的小苍兰花叶病毒正向引物、0.02-0.04μmol/L的小苍兰花叶病毒反向引物、0.02-0.07μmol/L的菜豆黄花叶病毒正向引物、0.02-0.07μmol/L的菜豆黄花叶病毒反向引物，其余成分为灭菌双蒸水；其中，每所述引物对中的正向引物和反向引物的浓度均相等，所述黄瓜花叶病毒正向引物、黄瓜花叶病毒反向引物、小苍兰花叶病毒正向引物、小苍兰花叶病毒反向引物、菜豆黄花叶病毒正向引物、菜豆黄花叶病毒反向引物的浓度均是以反应体系的总体积50μL为基准；

反应程序：A.94℃预变性5min、94℃变性30s、52-58℃退火30s、72℃延伸1min，循环35次；B.72℃延伸10min；C.4℃终止反应。