[发明专利]表达牛γ干扰素的Flp-In-293细胞系及其建立方法无效
| 申请号： | 201110306715.6 | 申请日： | 2011-10-10 |
| 公开（公告）号： | CN102321589A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 焦新安;陈祥;徐正中;殷月兰;孙林;潘志明;黄金林;耿士忠 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/85 |
| 代理公司： | 南京知识律师事务所 32207 | 代理人： | 卢亚丽 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 表达 干扰素 flp in 293 细胞系 及其 建立 方法 | ||
【权利要求书】：
1. 一种表达牛γ干扰素的细胞系B1，其特征在于是含有编码牛γ干扰素基因BoIFN-γ的Flp-In-293细胞系。
2. 根据权利要求1所述的细胞系B1，其特征在于在所述编码牛γ干扰素的基因之前有Kozak序列。
3. 一种建立权利要求1所述细胞系B1的方法，包括以下步骤：将序列正确的preBoIFN-γ片段构建成重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG，采用脂质体转染法将重组质粒pcDNA5/FRT-preBoIFN-γ-FLAG与重组酶表达载体pOG44共转染Flp-In-293细胞，使用含120μg/mL Hygromycin B的DMEM培养基进行阳性克隆筛选，扩大培养后采用有限稀释法进行亚克隆，通过鉴定后获得重组细胞系。
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