[发明专利]一种高纯度苦树素A的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物化学领域，特别是涉及一种高纯度苦树素A的制备方法。

背景技术

苦树Picrasma quassioides(D.Don) Benn.为苦木科苦树属植物。苦树属是我国所有的苦木科植物5个属中的一个，该属植物为多年生落叶乔木，高达10余米，树皮紫褐色，平滑，有灰色斑纹，全株有苦味，喜生长于湿润而肥沃的山坡、山谷、林缘、溪边和路旁等地。《中国植物志》记载，我国分布该属植物有中国苦树P.chinensisP. Y. Chen、光序苦树(变种)P.quassioides(D. Don) Benn. Var. glabrescens Pamp.、苦树(原变种)P.quassioides(D. Don) Benn. var.quassioides2个种和1个变种。

该属植物苦树是我国南方民间用药，历代本草均未见记载，《中国药典》1977年版一部开始收载。其性寒，味苦，归肺，大肠经，有清热燥湿、解毒、杀虫之功效。临床上多用于抗感染、降血压等方面的治疗。主要分布于我国黄河以南各省，以广东广西山区资源最为丰富。苦树化学成分复杂，目前国内外对其化学成分的报道有铁屎米酮类生物碱、咔巴啉类生物碱、苦木苦味素、甘遂型三萜、酚苷、酚酸、苯丙素、二氢黄酮苷类化合物。其中苦树素A具有特异地抑制35S-TBPS与大鼠脑膜的结合，其IC₅₀为0.18μM；苦树素A还具有杀虫活性，对蟑螂的LD₅₀为1.1μg/蟑螂。

目前尚未见采用高速逆流色谱法分离纯化苦树素A的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种苦树素A的制备方法，采用高速逆流色谱法，可以快速高效得到高纯度苦树素A。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

1）以浆果苦树茎皮为原料，粉碎，5-8倍量低碳醇超声提取，提取液减压浓缩至浸膏，再将硅胶氧化铝混合均匀装柱，将苦树浸膏用氧化铝拌样，上硅胶氧化铝混合柱，用混合溶液洗脱，硅胶薄层色谱监测，收集洗脱液，减压浓缩得浓缩液；

2）将正己烷、甲醇、水在分液漏斗中充分混合，静置分层后，取下相做固定相，充满逆流色谱仪柱，开转主机，泵入上相做流动相，平衡后，由进样阀注进浓缩液，根据检测器图谱，收集组分，回收试剂，干燥即得高纯度苦树素A。

步骤1）中所述的低碳醇为70-90%的甲醇或乙醇溶液。

步骤1）中所述的超声提取次数为2-3次，每次30-60min。

步骤1）中的硅胶氧化铝柱层析：硅胶和氧化铝的比例为5-10：1。

步骤1）所述混合溶液为85-65：2的氯仿-甲醇溶液或氯仿-丙酮中的一种。

步骤2）所述的正己烷、甲醇、水混合比例为4-6:3-8:3。

步骤2）所述的主机转速700-1000rpm，流动相流速1-3ml/min。

本发明的优点是工艺采用硅胶氧化铝混合柱和高速逆流色谱联合制备苦树素A，生产制备量大、纯度高、易操作、生产周期短、收率高。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

硅胶薄层色谱法：

薄层板：硅胶GF254薄层板

展开剂：石油醚-丙酮(2:1)

显色剂：香草醛乙醇浓硫酸。

实施例1：

取浆果苦树茎皮粉碎，取10kg，投入超声提取罐，加入5倍量90%的甲醇溶液超声提取2次，每次60min，合并2次提取液减压浓缩无醇，和硅胶、氧化铝（5：1）混合均匀装柱，将苦树浸膏用其3倍量的氧化铝拌样，上硅胶氧化铝混合柱，用85：2的氯仿-甲醇溶液洗脱，薄层色谱监测，收集洗脱液，浓缩干燥得干燥物；

取正己烷、甲醇、水，按4:3:3比例在分液漏斗中充分混合，静置分层后，取下相做固定相，充满逆流色谱仪柱，开转主机，转速调整为700rpm，泵入上相做流动相，平衡后，流速调整为3ml/min，由进样阀注进浓缩液，根据检测器图谱，收集组分，回收试剂，干燥得苦树素A805mg，经检测，含量98.2%。

实施例2：