[发明专利]近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测引物和试剂盒及检测方法无效
| 申请号: | 201110303598.8 | 申请日: | 2011-10-09 |
| 公开(公告)号: | CN102312010A | 公开(公告)日: | 2012-01-11 |
| 发明(设计)人: | 沈定霞;王凯飞;刘朝军;叶丽艳;郭玲;张有江 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙) 11357 | 代理人: | 赵慧 |
| 地址: | 100853*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 平滑 念珠菌 环介导 等温 扩增 快速 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
1.近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测引物,包括一对内引物和一对外引物,其特征在于,所述的一对内引物的序列如SEQ ID NO 1和SEQ ID NO 2所示,所述的一对外引物的序列如SEQ ID NO 3和SEQ ID NO 4所示。
2.近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测试剂盒,其特征在于,该试剂盒含有权利要求1所述的近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测引物以及环介导等温扩增反应试剂。
3.近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测方法,其特征在于,对待检测样品经过培养后提取DNA,得DNA模板,利用权利要求1所述的近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测引物进行环介导等温扩增,然后进行判读。
4.根据权利要求3所述的近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测方法,其特征在于,环介导等温扩增的反应体系中的混合引物由各自浓度均为10μM的SEQ ID NO 1~4各序列按8∶8∶1∶1的比例配制而成。
5.根据权利要求3所述的近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测方法,其特征在于,在20μl的环介导等温扩增的反应体系中含如下成分:20mM pH8.8的Tris-HCl,10mM KCL,10mM(NH4)2SO4,2mM MgSO4,0.1%Triton X-100,3.6μl混合引物,8U bstDNA聚合酶,1.5μlDNA模板,1.2mM dNTP,0.8M甜菜碱,加H2O至20μl。
6.根据权利要求3所述的近平滑念珠菌环介导等温扩增的快速检测方法,其特征在于,通过浊度、SYBR green I荧光反应的颜色或琼脂糖凝胶电泳的条带形状进行判读。
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