[发明专利]双子叶植株转基因受体的快速制备方法有效
| 申请号: | 201110303049.0 | 申请日: | 2011-10-10 |
| 公开(公告)号: | CN102321666A | 公开(公告)日: | 2012-01-18 |
| 发明(设计)人: | 寿惠霞;唐桂香;周练;马林;宋张悦;杨晓凤;周正剑 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
| 主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
| 代理公司: | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人: | 金祺 |
| 地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 双子 植株 转基因 受体 快速 制备 方法 | ||
1.双子叶植株转基因受体的快速制备方法,其特征是包括以下步骤:
1)、双子叶植株种子的表面消毒:
将双子叶植株种子单层置于培养皿中,将上述装有双子叶植株种子的培养皿开盖放入干燥器内,在干燥器内加入质量浓度为5~6%的次氯酸钠溶液,然后再加入11~13mol/L的HCl溶液,所述次氯酸钠溶液与HCl溶液的体积比为100∶3~4;
密封干燥器后,于室温下灭菌10~16小时;
灭菌完成后,先将培养皿加盖,然后从干燥器内转移到无菌超净台上,打开培养皿的盖子以除去培养皿内的残留氯气;得灭菌后双子叶植株种子;
2)、双子叶植株种子的吸胀:
将所述灭菌后双子叶植株种子放入灭菌后的分化罐中,并加入无菌水,所述灭菌后双子叶植株种子在黑暗下于18~22℃浸泡12~15小时;得吸胀后双子叶植株种子;
3)、受体的制备:
将所述吸胀后双子叶植株种子置于无菌吸水纸中,沿着种脐纵向切割从而将子叶分开两瓣,去除种皮,得双子叶植株转基因受体。
2.根据权利要求1所述的双子叶植株转基因受体的快速制备方法,其特征是:所述双子叶植株为大豆或豇豆。
3.根据权利要求2所述的双子叶植株转基因受体的快速制备方法,其特征是:所述步骤1)中:每个培养皿中放置120~170颗大豆种子,每个干燥器内放置3~4个所述装有大豆种子的培养皿;在干燥器内加入100ml质量浓度为5~6%的次氯酸钠溶液和3~4ml的摩尔浓度为11~13mol/L的HCl溶液。
4.根据权利要求3所述的双子叶植株转基因受体的快速制备方法,其特征是:所述步骤1)中:打开培养皿的盖子以除去培养皿内的残留氯气的时间为25~40分钟。
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