[发明专利]小分子化合物TWS119作为神经干细胞分化诱导剂的新应用

权利要求书

1.TWS119(4，6-二取代吡咯[2，3-d]嘧啶)作为诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的诱导剂的新应用。

2.诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基，其特征在于：所述细胞培养基中含有诱导剂TWS119。

3.根据权利要求2所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基，其特征在于所述细胞培养基中含有浓度为200～500nM的诱导剂TWS119。

4.根据权利要求3所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基，其特征在于所述细胞培养基中含有浓度为350nM的诱导剂TWS119。

5.根据权利要求2、3、4之任一权利要求所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基，其特征在于所述细胞培养基中还含有胎牛血清。

6.根据权利要求5所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基，其特征在于所述细胞培养基中还含有体积百分浓度为5～20％的胎牛血清。

7.根据权利要求6所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基，其特征在于所述细胞培养基中还含有体积百分浓度为10％的胎牛血清。

8.权利要求2所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基的制备方法，包括以下步骤：

a.DMEM/F12基础培养液的制备：取制备DMEM/F12基础培养液1L用量的DMEM/F12(1∶1)干粉1袋、谷氨酰胺2.5g，用浓度为0.1mol/L、pH值为7.35的磷酸盐缓冲液即PBS溶解并稀释至1L，调节pH值为7.5，用0.2um微孔滤膜过滤除菌，即得；

b.细胞培养基的制备：按照制备100ml细胞培养基计，将诱导剂TWS119(200～500nM)加入步骤a制得的DMEM/F12基础培养液70ml使溶解，用0.2um微孔滤膜过滤除菌后，加入胎牛血清5～20ml、青霉素与链霉素的混合液(即由浓度为4万U/ml的青霉素溶液、浓度为4万U/ml的链霉素溶液按1∶1混合而成)的溶液1ml，最后用DMEM/F12基础培养液定容至100ml，即得。

9.根据权利要求8所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基的制备方法，其特征在于步骤b中诱导剂TWS119的终浓度为350nM。

10.根据权利要求9所述的诱导哺乳动物神经干细胞向神经元分化的细胞培养基的制备方法，其特征在于步骤b中诱导剂TWS119的终浓度为350nM，胎牛血清的加入量为10ml。