[发明专利]拟南芥脱水应答原件结合蛋白及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种拟南芥来源的脱水应答原件结合蛋白2A组成型激活基因(AtDREB2A-CA)，其特征在于选自以下核苷酸序列之一：

1)具有SEQ ID No.1所示的核苷酸序列；

2)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列添加、取代、插入或缺失一个或多个核苷酸的70％的同源序列或者其等位基因及其衍生的核苷酸序列。

2.权利要求1所述的拟南芥脱水应答原件结合蛋白2A组成型激活基因编码的蛋白质，其特征在于所述的蛋白质具有SEQ ID No.2所示的氨基酸序列。

3.一种重组载体，其特征在于含有权利要求1所述的拟南芥脱水应答原件结合蛋白2A组成型激活基因(AtDREB2A-CA)全序列或部分片段。

4.一种权利要求3所述的重组载体，其特征在于它是重组植物表达载体pH7m24GW，3-Prd29A-DREB2A-CA。

5.一种宿主细胞，其特征在于含有权利要求1所述的拟南芥脱水应答原件结合蛋白2A组成型激活基因(AtDREB2A-CA)全序列或部分片段。

6.一种权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于它是农杆菌细胞，烟草细胞，玉米细胞或者大豆细胞。

7.权利要求1所述的拟南芥来源的脱水应答原件结合蛋白2A组成型激活基因(AtDREB2A-CA)的克隆方法，其特征在于由下述步骤组成：

(1)从拟南芥叶片中提取总RNA，做逆转录PCR，得到AtDREB2A基因，将此基因连接PBS-TII载体；得到中间载体PBS-TII-AtDREB2A；

(2)以PBS-TII-AtDREB2A为模板，用折叠延伸PCR(SOE-PCR)方法扩增得到拟南芥脱水应答原件结合蛋白2A组成型激活基因(AtDREB2A-CA)；

(3)将上述PCR扩增产物经EcoRI和EcoRV酶切后，将植物表达载体pH7m24GW，3-Prd29A经EcoRI和EcoRV酶切，二者进行连接反应，得到植物表达载体pH7m24GW，3-Prd29A-DREB2A-CA。

8.一种权利要求1所述的拟南芥脱水应答原件结合蛋白2A组成型激活基因(AtDREB2A-CA)的应用，其特征在于它用于制备转基因玉米、大豆、水稻、花生、向日葵、马铃薯、棉花、谷子、大麦以及花卉和蔬菜植株。