[发明专利]通过EB病毒p18与p23融合衣壳抗原检测EBV特异性的方法无效
申请号: | 201110281092.1 | 申请日: | 2011-09-21 |
公开(公告)号: | CN102384976A | 公开(公告)日: | 2012-03-21 |
发明(设计)人: | 邱清芳 | 申请(专利权)人: | 邱清芳 |
主分类号: | G01N33/569 | 分类号: | G01N33/569 |
代理公司: | 烟台双联专利事务所(普通合伙) 37225 | 代理人: | 梁翠荣 |
地址: | 264006 山东省烟台*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 eb 病毒 p18 p23 融合 抗原 检测 ebv 特异性 方法 | ||
1.一种通过EB病毒p18与p23融合衣壳抗原检测EBV特异性的方法,其特征在于:
采用重叠延伸PCR技术,借一中间接头(Gly4Ser)3的编码序列,将编码p23和p18编码基因在体外进行融合;
测序无误后将融合基因克隆至表达载体,利用大肠杆菌表达融合蛋白;
将表达产物纯化后应用免疫印迹法鉴定其特异性,然后以纯化融合蛋白包被ELISA反应板,优化各种成分含量及反应条件,配套商品化的辣根过氧化酶标记的羊抗人IgM、IgG及其它一系列试剂,组装成EBV VCA特异性IgM和IgG间接法ELISA诊断试剂盒;
选择相关病人进行检测,并与EB病毒血清学检测IFA法进行比较,计算所述试剂盒的敏感性、特异性、约登指数、符合率、阳性预测值和阴性预测值等指标,同时检测诊断试剂的特异性、重复性和稳定性。
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