[发明专利]检测呋喃西林代谢物的酶联免疫试剂盒及其方法有效
申请号: | 201110278976.1 | 申请日: | 2011-09-20 |
公开(公告)号: | CN103018448A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 万宇平;冯才茂;冯静;余厚美;朱亮亮;杜亚菲;刘琳;付军权 | 申请(专利权)人: | 北京勤邦生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/531 |
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地址: | 102206 北京市昌平*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 呋喃 西林 代谢物 免疫 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种呋喃西林代谢物酶联免疫检测试剂盒,其包括包被有包被原的酶标板、呋喃西林代谢物特异性抗体、酶标记物、标准品溶液、底物显色液、终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液、2-硝基苯甲醛,所述包被原为呋喃西林代谢物抗原,所述酶标记物为酶标记抗抗体。
2.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述呋喃西林代谢物抗原为呋喃西林代谢物半抗原与载体蛋白的偶联物,所述载体蛋白为牛血清白蛋白、鼠血清蛋白、兔血清蛋白、甲状腺蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白或人血清白蛋白。
3.如权利要求1-2所述的试剂盒,其特征在于:所述呋喃西林代谢物半抗原的制备方法主要包括如下步骤:
0.75g呋喃西林代谢物(SEM)和20ml DMF的混合液,室温下缓慢滴加入2.68-5.36g对苯二甲醛的50-100ml DMF溶液中,滴加完毕后室温至60℃反应2-4小时,除去溶剂,柱层析纯化,得到淡黄色SEM衍生物。
4.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的呋喃西林代谢物特异性抗体为呋喃西林代谢物单克隆抗体。
5.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述抗抗体为羊抗鼠抗抗体。
6.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述酶标记物的标记酶为辣根过氧化物酶;酶标记抗抗体是采用过碘酸钠法将标记酶与抗抗体偶联得到。
7.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述的终止液为2mol/L的硫酸溶液,所述底物显色液A液为过氧化脲溶液,底物显色液B液为四甲基联苯胺溶液。
8.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述浓缩洗涤液为0.8%~1.2%吐温-20和0.01%~0.02%的叠氮化钠防腐剂的0.2~0.4mol/LpH7.6磷酸盐缓冲液,所述浓缩复溶液为pH值为7.6,含有9%~12%卵清蛋白、0.1~0.3mol/L的磷酸盐缓冲液。
9.如权利要求1所述的试剂盒,其特征在于:所述标准品溶液浓度分别为0μg/L、0.05μg/L、0.15μg/L、0.45μg/L、1.35μg/L、4.05μg/L。
10.用权利要求1-9所述的呋喃西林代谢物酶联免疫试剂盒检测样品中呋喃西林代谢物的方法,主要步骤包括:
1)将待测样品进行前处理,得到待测样品溶液;
2)用权利要求1-9任一项所述的酶联免疫试剂盒检测待测样品溶液;
3)分析检测结果。
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