[发明专利]一种疱疹病毒Ⅱ型PCR荧光定量快速检测试剂盒及方法

权利要求书

1.一种疱疹病毒II型PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，包括PCR反应液，所述PCR反应液包括引物和荧光探针，所述引物分为上游引物和下游引物：

上游引物：5′-CCCAAGCTCCCGCTAAGG-3′；

下游引物：5′-CGCCTTGGCAGCACAACT-3′；

荧光探针：5′-FAM-CCTGCTCTAGATATCCT-TAMRA-3′。

2.按权利要求1所述的疱疹病毒II型PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括DNA提取液，PCR反应液，DNA聚合酶，阳性质控品，弱阳性质控品，阴性质控品，定量参比品。

3.按权利要求1所述的疱疹病毒II型PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，引入了一个人工构建的内参照系统用于避免检测结果假阴性，内参照系统包括内参探针、引物和内参DNA，所述内参照系统为拟南芥内参照系统，所述内参照系统包括上游引物序列：SEQ ID NO.5、下游引物序列：SEQ ID NO.6和探针序列：SEQ ID NO.7。

4.按权利要求1所述的疱疹病毒II型PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，所述阳性质控品浓度为10倍梯度10⁶copies/mL-10⁷copies/mL，所述弱阳性质控品浓度为10³copies/mL-10⁴copies/mL。

5.按权利要求1所述的疱疹病毒II型PCR荧光定量快速检测试剂盒，其特征在于，所述DNA聚合酶包括tap酶、UNG酶。

6.一种疱疹病毒II型PCR荧光定量快速检测方法，其特征在于，其中PCR扩增的靶序列为SEQ ID NO.4，PCR扩增所用引物为：上游引物序列如：SEQ ID NO.1，下游引物序列如：SEQ ID NO.2，荧光探针序列如：SEQ ID NO.3。

7.按权利要求6所述的疱疹病毒II型PCR荧光定量快速检测方法，其特征在于，所述荧光探针5’端标记FAM荧光基团，3’端标记TAMRA淬灭基团。