[发明专利]一种角类多肽、其分离方法及抗氧化用途有效
申请号: | 201110278430.6 | 申请日: | 2009-10-26 |
公开(公告)号: | CN102304170A | 公开(公告)日: | 2012-01-04 |
发明(设计)人: | 刘睿;段金廒;钱大玮;唐于平;郭建明 | 申请(专利权)人: | 南京中医药大学 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C07K1/36;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/16;A61K38/08;A61P39/06 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人: | 孙立冰 |
地址: | 210029 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 多肽 分离 方法 氧化 用途 | ||
1.具有式II的多肽或其药学上可接受的盐:
Tyr-Glu-Asp-Cys-Thr-Asp-Cys-Gly-Asn(II)。
2.权利要求1的多肽的制备方法,包括:
a、取水牛角粉,用纯水加热回流提取,滤过,滤液浓缩冷冻干燥,得粗提物;
b、对粗提物进行凝胶柱层析分离,在254nm下检测流出样品,根据检测器的样品峰收集每个组分,测定抗氧化活性;
c、将最高抗氧化活性的组分进一步利用DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换柱分离纯化,离子交换柱先用50mM磷酸盐缓冲液pH6.5,以1ml/min流速预处理3h;上样后,离子交换柱用50mM磷酸盐缓冲液pH6.5,以1ml/min流速洗脱2h,然后以线性梯度为0-0.3MNaCl的磷酸盐缓冲液50mM,pH6.5洗脱,洗脱曲线在254nm下检测;根据洗脱峰收集每个组分,冷冻干燥;
d、将c得到的冻干粉,纯水溶解成较高浓度,通过Waters 2545-2489-2676自动纯化HPLC系统进行脱盐,测定抗氧化活性,得到较好抗氧化活性组分D2和D3;
e、将组分D2和D3,再通过Waters 2545-2489-2676自动纯化HPLC系统进一步分离纯化;以线性梯度为2%-60%甲醇洗脱,其中含0.1%三氟乙酸,在230nm下检测;D2组分反相HPLC层析分离时,收集保留时间约为7.3min的色谱峰,为多肽II;收集得到的样品,减压浓缩除去甲醇后,冷冻干燥;得到多肽II的冻干粉。
3.一种药物组合物,其中含有权利要求1的多肽或其药学上可接受的盐及药学上可接受的载体。
4.权利要求1的多肽或其药学上可接受的盐用于制备抗氧化药物的用途。
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