[发明专利]草莓专用复合抗重茬剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于微生物复配制剂的制备，特别是指一种草莓专用复合抗重茬剂的制备方法。

背景技术

草莓浆果鲜红艳丽，芳香多汁，甜酸可口，营养丰富，被视为果中珍品。目前全国已有栽培草莓面积近4万公顷，产量20多万吨。草莓重茬病是草莓生产的重要问题，国内外的研究表明，造成作物重茬的主要原因是土壤营养元素的缺乏和土传病害所致，草莓在同一田块上连作2年一般减产10-15%，连作3年减产20%-25%，连作4年以上减产40%以上，严重者甚至绝收。

草莓种植过程中，特别是连作种植极易造成土壤的营养元素缺乏，合理有效地补充相关元素是现代农业种植中的一项重要措施。草莓病害以土传病害为主，常见的炭疽病、灰霉病、白粉病和根腐病等都是由细菌和霉菌传播的；病毒病主要有草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒等多种植物病毒，主要由蚜虫传播；草莓的虫害主要的有草莓芽线虫、草莓根腐线虫、红蜘蛛和蚜虫。

目前草莓要连种普遍采用的方法就是化学熏蒸法。该方法使用成本高达每公顷一万五千元以上，仅当年有效，同时熏蒸用化学物质大多是剧毒物，对大气和土壤都有严重的破坏。在草莓产业化市场不断扩大的情况下，对绿色无公害产品的需求也日益扩大。草莓重茬病的生物防治，对环保和绿色食品的要求，对提高草莓国际市场竞争力都具有非常重要的意义。

随着绿色食品、绿色农业的发展，生物肥料开始大规模使用于现代化农业种植上，在生物肥料中，微生物肥料以其用量少、成本低、作用效果显著而成为首选。具有解钾作用的胶质芽孢杆菌和具有解磷作用的巨大芽孢杆菌制成的钾磷复合肥是近年来生物肥料市场的广泛使用的一种微生物活菌制剂。微生物肥料在培肥地力，提高化肥利用率，净化和修复土壤，降低农作物病害发生，保护环境，以及提高农作物产品品质和食品安全等方面都表现出了不可替代的作用。

细黄链霉菌（Streptomyces  micrcflav )是一株对多种病原菌有拮抗作用的抗生性放线菌，用此菌株生产的抗生菌肥，不但能抑制多种病原菌的生长，还具有刺激作物发芽、生根等作用。放线菌肥料在多年的使用中，取得了良好的抗病、增产效果。目前用细黄链霉菌生产抗生菌肥有固体和液体发酵两种方法，固体发酵生产周期较长，产品质量不稳定；液体发酵产品以菌丝体的形式存在，不形成孢子，一方面不利于保藏和贮存，产品保质期短，另一方面在应用中菌丝体的效果也没有孢子好。

发明内容

本发明的目的在于提供一种草莓专用复合抗重茬剂的制备方法，利用液体菌种和固体发酵相结合的方法，发酵生产细黄链霉菌抗生菌肥，保证了产品质量的稳定和大量的孢子形成。根据草莓的需肥特点添加微量元素，并与具有解磷解钾功能的微生物菌肥——生物磷钾肥复配，生产出多功能防治草莓重茬病的生物制剂——草莓专用复合抗重茬剂，该产品既可以解决由土传病菌引起的重茬问题，又可以解决由土壤缺素引起的重茬问题，同时由于加入了解磷解钾菌株，在植物根部形成了有益微生物菌群，改善了土壤的微生态环境，也为草莓生长提供了磷钾营养元素。

    本发明的整体技术构思是：

草莓专用复合抗重茬剂的制备方法，包括如下工艺步骤：

A、细黄链霉菌抗生菌剂的制备

A1、液体种子的制备

将原始菌种接种至灭菌后的液体培养基中进行摇床培养制成液体种子，培养条件为转速180转/分钟、培养温度28℃-30℃、培养周期24小时；接种时加入约5毫升无菌水在试管菌种中，用接种针刮起菌苔，制成菌悬液，每支斜面接种3-5个三角瓶；

上述液体培养基由如下质量百分比的原料组成：

玉米粉1.8%-2%，豆饼粉2%-2.5%，淀粉0.8%-1.2%，余量为水；

原始菌种选用菌株细黄链霉菌（Streptomyces  micrcflav ) ，其保藏编号为CGMCC4.891；

A2、固体发酵

A2-1曲盘培养：将步骤A1中制备的液体种子接种到灭菌后的曲盘培养基进行培养，接种量为液体种子与灭菌后的曲盘培养基的质量比等于5%-8%，培养条件为温度28℃-30℃、湿度50%-70%、培养周期5-6天，待基质全部出现粉色孢子，香味浓郁时出料；

曲盘培养的培养基由如下质量百分比的原料组成：

豆饼粉4%-5%，石灰1.5%-2%，甘薯粉12%-15%，锯末15%-20%，细土33%-35%，余量为水；