[发明专利]一种非洲菊组培穴盘苗的繁育方法

权利要求书

1.一种非洲菊组培穴盘苗的繁育方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）无菌材料的获得

采取直径小于1cm、未露出小花的非洲菊幼小花蕾，用自来水流水冲洗20min，然后在超净工作台内将花蕾置于无菌瓶中，依次用70%酒精浸泡30s，0.1%升汞中加入其体积0.1%吐温-80浸泡8-10分钟，再用无菌水冲洗4-6遍后待用；

（2）不定芽的诱导分化

将步骤（1）得到的无菌材料用小镊子剥去花蕾上的所有苞片，再切掉花蕾表面小花及苞片基部，剩余花托部分，将花托切成4块，接种于不定芽诱导分化培养基上，将培养瓶置于温度25℃，光照强度1500-2500lx，光照时间14小时/天的条件下进行培养，1-2周后外植体膨大，3-4周后出现黄绿色愈伤组织，4-6周后可分化出不定芽；

（3）不定芽的增殖

将步骤（2）得到的不定芽接种到增殖培养基上进行增殖培养，培养室内温度25℃，光照强度1500-2500lx，光照时间14小时/天，4周继代培养一次，增殖系数为3-6；

（4）不定芽的生根

将步骤（3）得到的不定芽接种到生根培养基上进行生根诱导培养，培养室内温度25℃，光照强度1500-2500lx，光照时间14小时/天，10天后生根率可达99%，生根数目平均3-4条/株，根长度为0.5-1.0cm；

（5）炼苗

将步骤（4）得到的生根苗在培养室内打开培养瓶的瓶口炼苗2-3天；

（6）穴盘移栽

炼苗结束后，将组培苗从培养瓶内取出，洗净根部存留的培养基，避免伤害组培苗的幼根，然后移栽到盛有基质的穴盘中，穴盘填充的移栽基质含水量为60%-70%，移栽后覆塑料薄膜保温保湿；

（7）穴盘苗管理

组培苗移栽后保持白天温度20~30℃，夜间最低温度不低于12℃，湿度90%以上；10天后揭开塑料薄膜使小苗逐步适应湿度50%-70%的环境条件，移栽2周后开始施用肥料，在此条件下培养30-40天。

2.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法，其特征在于：所述的不定芽诱导分化培养基是在1/2MS培养基中添加2.0-10.0mg/L 6-苄基腺嘌呤、0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉，调节pH为5.8-6.2。

3.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法，其特征在于：所述的不定芽增殖培养基是在MS培养基中添加0.5-2.0mg/L 6-苄基腺嘌呤或0-10.0mg/L激动素、0.1-0.5 mg/L吲哚乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉，调节pH为5.8-6.2。

4.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法，其特征在于：所述的不定芽生根培养基是在1/2MS培养基中添加0.1-0.5mg/L 吲哚乙酸或0.05-0.5mg/L 吲哚丁酸或0.01-0.02mg/L 萘乙酸、30g/L 蔗糖和3-4g/L 琼脂粉，调节pH为5.8-6.2。

5.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法，其特征在于：所述的育苗穴盘规格为72~128孔。

6.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法，其特征在于：移栽基质为重量75%泥炭加25%蛭石。

7.根据权利要求1所述的非洲菊的组培穴盘苗的繁育方法，其特征在于：移栽2周后施用肥料为氮、磷、钾复合肥，采用两种比例为20：10：20或14：0：14，两种比例氮磷钾复合肥分别用2000倍液交替施用。