[发明专利]一种测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法

权利要求书

1.一种测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法，其特征在于：

1)将预处理后的样品加入到含有CaCl₂的提取剂中溶解，溶解后依次经超声提取、震荡提取，而后离心收集上清液，待用；

2)将上述收集的上清液通过HLB固相萃取柱分离，萃取富集收集洗脱液，过滤后待用；

3)利用高效液相色谱测定上述收集的滤液中磺胺类及四环素类抗生素的量；其中，提取剂为按体积比1∶1组成的甲醇和EDTA-Mcllvaine缓冲液，CaCl₂与提取剂的质量比为1∶9；固相萃取洗脱液为甲醇。

2.按权利要求1所述的测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法，其特征在于：所述高效液相色谱条件为：流动相由乙腈(A)和0.01mol/L草酸溶液(B)组成，柱温为30℃，流速为1.0ml/min；进样量为20μl。

3.按权利要求2所述的测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法，其特征在于：所述检测器波长范围设定为270nm-370nm；高效液相色谱仪采用Waters2695-2696，液相色谱柱选用Waters XTerraRP-18(250×4.6mm，5μm)。

4.按权利要求2所述的测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法，其特征在于：所述流动相为经过0.45μm有机膜超声震荡10min后的乙腈(A)，经0.45μm水膜超声震荡10min后的浓度为0.01mol/L的草酸溶液(B)。

5.按权利要求1所述的测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法，其特征在于：所述样品预处理为将污水处理厂采集的脱水污泥、畜禽养殖场采集的畜禽粪或土壤样品用锡箔纸包裹，冷冻干燥后于-20℃中保存，备用。

6.按权利要求1所述的测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法，其特征在于：所述步骤1)将2g预处理后的样品加入到10ml含有CaCl₂的提取剂中溶解，溶解后依次经超声提取、震荡提取，各15min，而后以4000r/min离心10min收集上清液，沉淀再次溶解在含有CaCl₂的提取剂中提取2-3次，收集上清液，合并上述上清液待用。

7.按权利要求1所述的测定土壤、污泥及动物粪便中磺胺类及四环素类抗生素的方法，其特征在于：所述步骤2)将上述收集的上清液通过采用提取剂活化处理后的HLB固相萃取柱分离，先用高纯水淋洗HLB小柱，干抽20min，再用3ml甲醇洗脱HLB小柱，洗脱液流速为1ml/min，萃取富集收集洗脱液在40℃水浴下用氮气吹至近干，用体积比3∶2的甲醇和水溶液定容，定溶后溶液过0.22μm滤膜后收集样品，待测。