[发明专利]β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因及其表达产物和应用

权利要求书

1.一种β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因，其特征在于，包括如下序列：

(a)、编码由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽的多核苷酸，或者所述多核苷酸的互补链；

(b)、和编码由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽的多核苷酸具有至少98％同源性的多核苷酸，或者所述多核苷酸的互补链；

(c)、编码多肽的多核苷酸或所述多核苷酸的互补链，所述多肽由SEQ IDNo.1所示的氨基酸序列组成，其中一个或多个氨基酸被缺失、替代或增加，且所述多肽具有β-葡聚糖内切酶活性；或

(d)、编码多肽的多核苷酸或所述多核苷酸的互补链，所述多肽与由SEQ IDNo.1所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少98％的同源性。

2.一种β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因，其特征在于，包括如下序列：

(a)、由SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的多核苷酸，或者所述多核苷酸的互补链；

(b)、和编码由SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的多核苷酸具有至少98％同源性的多核苷酸，或者所述多核苷酸的互补链；或

(c)、编码多肽的多核苷酸或所述多核苷酸的互补链，所述多核苷酸序列由SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成，其中一个或多个密码子被缺失、替代或增加，所述多肽具有β-葡聚糖内切酶活性。

3.如权利要求2所述的β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因，其特征在于，所述β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因包括由SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的多核苷酸。

4.一种基因表达载体，其特征在于，包括如权利要求1或2所述的β-葡聚糖内切酶PEGase-1基因。

5.一种宿主细胞，其特征在于，包括如权利要求4所述的基因表达载体，所述宿主细胞为真核生物细胞。

6.如权利要求5所述的宿主细胞，其特征在于，所述真核生物细胞为酵母细胞或里氏木霉细胞。

7.一种蛋白质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、提供如权利要求5所述的宿主细胞，诱导表达得到表达液；

步骤二、利用40％和70％的饱和硫酸铵将所述表达液分级沉淀，分离粗产物；

步骤三、利用HiTrap^TM Capto^TM Q离子交换层析胶纯化粗产物，得到所述蛋白质。

8.一种蛋白质，其特征在于，包括如下序列：

(a)、由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽；

(b)、和由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少98％同源性的多肽；或

(c)、由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽，其中一个或多个氨基酸被缺失、替代或增加，且所述多肽具有β-葡聚糖内切酶活性。

9.一种酶制剂，其特征在于，包括如权利要求8所述的蛋白质；所述酶制剂用于水解β-1，3(4)-葡聚糖。

10.如权利要求9所述的酶制剂，其特征在于，所述酶制剂还包括用于提高酶活性的金属阳离子。