[发明专利]高氮鲜酵母和抽提物的制备方法

权利要求书

1.一种高氮鲜酵母的制备方法，其特征是包括以下步骤：

（1）准备菌种：Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母，由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，保藏号为CGMCC No 5004；

（2）培养基按质量重量比：以固形物含量甜高粱汁液5-20Bx°为溶液，添加酵母粉0.5-5%，（NH₄）₂SO₄0.2-3%，MgSO₄0.03-1.5%，KH₂PO₄0.2-1.5%；

（3）甜高粱汁液的预处理：将压榨后的甜高粱汁液进行高温70-90℃蒸煮，时间为1-2小时，冷却后在3000-4000r/min离心分离，收集上清液备用；

（4）发酵：待发酵罐内灭菌后的甜高粱汁液降低到25-30℃的温度后，将酵母菌悬液按比例5%-10%接入到发酵罐内进行发酵；起始4-6小时可不通风或间歇通风；搅拌转速维持在50-100转/min；3-6小时后即进行流加糖液；

（5）经过适应期4-6小时后，且通风量为0.8-1.2V.V.m，搅拌速度为300-500转/min，添加营养盐（NH₄）₂SO₄ 0.2-3%、MgSO₄ 0.03-1.5%、KH₂PO₄ 0.2-1.5%；

（6）经过10-20h的对数生长期后，发酵逐渐进入到衰退期，发酵温度32-35℃，通风量为0.3-0.5V.V.m，搅拌速度为80-150转/min，停止流加糖液，测定发酵酪液中残糖浓度，小于0.5%视为发酵终了；

（7）发酵液处理：发酵酪液经过离心机分离，转速3000-4000转/min，维持10-15分钟后收集酵母湿菌体，加入5-15倍蒸馏水反复水洗2-3次，每次分离参与第一次水洗条件相同，洗涤完毕后得到含水分10%-30%的鲜酵母。

2.如权利要求1所述的高氮鲜酵母的制备方法，其特征是还包括以下步骤：

所述步骤（1）准备菌种的步骤包括有：

A.准备菌种：Saccharomyces cerevisiae酿酒酵母：

B.制备固体培养基按体积：按质量百分比葡萄糖3.0%-5.0%、蛋白胨0.5%-1.0%、酵母浸出粉0.2-1.0%、NH₄SO₄0.2%-3%、MgSO₄0.03%-1.5%、KH₂PO₄0.2%-1.5%，琼脂0.5%-1.5%，其余的为水的质量；

C.制备液体培养基：按质量百分比葡萄糖3.0%-5.0%、蛋白胨0.5%-1.0%、酵母浸出粉0.2-1.0%、NH₄SO₄ 0.2%-3%、MgSO₄ 0.03%-1.5%、KH₂PO₄ 0.2%-1.5%，其余为水：

D.斜面培养：将培养皿内的单菌落挑取后接入到已灭好菌的所述的固体培养基斜面上，25-35℃静置培养；

E.种子培养：挑取斜面菌种接入到已灭好菌的所述的液体培养基中，液体培养基为pH4-6，在25-35℃的温度下，摇床培养8-12小时，摇床转速为100-300r/min、接种量：5%-10%；

F.重离子辐照处理：待菌悬液肉眼观察浑浊进行1比98-102比例的稀释，对菌悬液进行重离子辐照诱变，辐照剂量为：20Gy-100Gy；

G.酵母菌种在温度-80℃保藏，若是斜面保藏在4℃保藏即可。