[发明专利]一种以大孔阴离子树脂为填充料的果糖基转移酶的初纯化方法无效
| 申请号： | 201110249360.1 | 申请日： | 2011-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN102286439A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 李玉;荆玮;刘逸寒;刘晓光;王稳航;路福平 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12R1/685 |
| 代理公司： | 天津盛理知识产权代理有限公司 12209 | 代理人： | 王来佳 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 阴离子 树脂 填充 果糖 转移酶 纯化 方法 | ||
1.一种以大孔阴离子树脂为填充料的果糖基转移酶的初纯化方法，其特征在于：将经预处理大孔阴离子树脂装层析柱，用20mmol/mL的pH值为6.5磷酸缓冲液以2.0mL/min的流速通过层析柱，平衡层析柱，将含有果糖基转移酶的粗酶液上样，用两倍体积的磷酸缓冲液洗脱，再用两倍体积的磷酸缓冲液配置的1mol/mL的NaCl溶液梯度洗脱，用UV280nm在线监测，收集有酶活的峰，将收集到有酶活的酶液浓缩即得果糖基转移酶。
2.根据权利要求1所述的以大孔阴离子树脂为填充料的果糖基转移酶的初纯化方法，其特征在于：所述大孔阴离子树脂为大孔阴离子树脂D290。
3.根据权利要求1所述的以大孔阴离子树脂为填充料的果糖基转移酶的初纯化方法，其特征在于：所述预处理大孔阴离子树脂的方法为：大孔阴离子树脂先用蒸馏水浸泡4h溶胀，除杂，然后用0.1mol/L的盐酸浸泡2h，去离子水冲洗至中性；再用0.1mol/L的氢氧化钠浸泡2h，用去离子水冲洗至中性，用2倍体积的去离子水浸泡，放置于4℃保存备用。
4.根据权利要求1所述的以大孔阴离子树脂为填充料的果糖基转移酶的初纯化方法，其特征在于：所述果糖基转移酶的粗酶液的制备方法如下：
将经过发酵培养的菌丝体，离心洗净，收集菌丝体，将菌丝溶于5倍体积的水，球磨机5000r/min条件下20min，球磨两次，然后在超高压均质机1000Pa破壁两次，冷冻离心，超滤浓缩得到粗酶液。
5.根据权利要求1所述的以大孔阴离子树脂为填充料的果糖基转移酶的初纯化方法，其特征在于：所用NaCl溶液梯度为0-1mol/mL。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于天津科技大学，未经天津科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201110249360.1/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
