[发明专利]一种离子树脂交换法制备肝素锂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及肝素锂的制备方法，特别涉及一种应用离子树脂交换制备肝素锂的方法。

背景技术

肝素主要从牛肺或猪小肠黏膜提取，是一种由葡萄糖胺、L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替组成的黏多糖硫酸脂。肝素通过与抗凝血酶III结合使其暴露精氨酸反应中心，与活化的凝血因子结合使其灭活，主要灭活Xa和IIa因子。肝素主要用于预防和治疗血栓栓塞性疾病，如心肌梗塞、肺栓塞、脑血管栓塞、外周静脉血栓等，可防止血栓的形成和扩大。还可用于DIC的早期及其它体内外的抗凝。

肝素锂在临床检验中有独特的价值，广泛用于急诊生化检查、血流变检查的血液标本的采集和抗凝。由于血液从人体抽出到凝固析出血清一般需要一小时以上的时间，严重影响急诊结果报告时间，因此临床急诊常用肝素抗凝血浆进行生化检查。当检验血标本中的钠离子时，为避免影响检测结果，常用肝素锂代替。此外，肝素锂还是红细胞渗透性试验的理想的抗凝剂。

目前，肝素锂的制备以肝素钠为原料、通过钠离子与锂离子的交换进行制备，该法需要选用精品肝素钠为原料，原料成本高造成肝素锂的价格昂贵。中国专利“离子平衡交换法制备肝素锂”(公开号CN1308351C)公开了一种制备肝素锂的方法，该方法使用了超滤技术进行浓缩，但钠离子与锂离子的交换是以溶液为媒介，交换不充分而影响产品的质量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种原料低廉、离子交换充分的肝素锂的制备方法。

为解决以上技术问题，本发明一种离子树脂交换法制备肝素锂的方法，包括如下步骤：

(1)盐解：

取粗品肝素钠的水溶液，加入NaCl使NaCl的含量为3wt％～5wt％，调整pH值为9～10，于40～45℃盐解2h后，降温至10℃，静置、离心、收集上清液；

(2)精制：

取步骤(1)所得的上清液和预处理的阴离子树脂搅拌2h，过滤，弃滤液；用3wt％NaCl的水溶液洗涤阴离子树脂；再用12％wtNaCl水溶液浸泡阴离子树脂，搅拌1h，过滤，重复上述步骤2次，合并滤液，加入滤液1wt％～3wt％的30％过氧化氢，调整滤液pH值为8.5～9.5，氧化脱色8～12h，加入1.0倍体积的甲醇溶液沉淀、过滤、甲醇洗涤、真空干燥即得肝素钠精品(效价大于150IU/mg)；

(3)转锂：

取步骤(2)所得的肝素钠溶解后，预冷，流过预先处理填装预冷的氢型阳离子树脂柱，流出液直接流经铺有碳酸锂的砂芯漏斗，滤液即为肝素锂溶液；

(4)冷冻干燥：

取步骤(3)所得肝素锂溶液浓缩后，经0.2微米滤膜精密过滤后冷冻干燥，得白色粉末即为肝素锂成品。

上述阴离子树脂为D958肝素钠提取树脂，氢型阳离子树脂为732型阳离子树脂。

与现有技术相比，本发明具有的有益效果为：

1、本发明提供的制备方法以来源广泛的粗品肝素为原料，成本低廉。

2、本发明肝素钠盐和肝素锂盐通过阳离子树脂进行交换，以离子交换液直接与锂源(碳酸锂)接触结合，离子交换完全；低温条件下交换，解决了离子交换后pH值过低对肝素锂质量的影响，保证了肝素的活性。

3、本发明应用阴离子树脂不仅可以提纯精制粗品肝素钠，还可以去除蛋白质、核酸以及其他类肝素杂质，从而在源头上有效控制了肝素锂的质量。

具体实施方式

实施例1

称取50g粗品肝素钠(90IU/mg)，溶于1000mL纯水中，加热至40℃，调pH9.5，加入30g(3wt％)NaCl，4M NaOH调节pH值8.5～9.5，搅拌2h后，调pH9.5，置8℃冰箱4h，离心，收集上清液；

500g阴离子树脂(D958型)用3wt％NaCl溶液浸泡后滤干，加入上述溶液搅拌2h，过滤，弃滤液；5000mL的3wt％NaCl溶液分三次洗涤阴离子树脂，过滤，弃滤液；300mL 12wt％NaCl溶液洗脱阴离子树脂，过滤，收集滤液，如此重复两次，合并滤液，即920mL；加入滤液2wt％的30％双氧水18.4mL，4M NaOH调节pH值8.5～9.5，搅拌12h；1MHCl调pH6.5，精滤，得950mL，加入950mL预冷的甲醇溶液沉淀，静置4h，过滤，洗涤，40℃真空干燥12h。得25.9g、效价为165IU/mg的精品肝素钠；