[发明专利]用于表征Cefroxadine的参照标准品及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种用于表征Cefroxadine的参照标准品及其制备方法和用途。

背景技术

β-内酰胺类抗生素是指化学结构式中具有β-内酰胺环的抗生素。它可通过共价键与细胞壁合成有关的青霉素结合蛋白(PBPs )结合，抑制细胞壁粘肽合成酶，从而阻碍细胞壁肽聚糖的合成，使细胞壁缺损，菌体破裂死亡。因其抗菌活性强、毒性低、对敏感细菌感染的疗效满意等优点，半个世纪以来，该类抗生素的研制和临床应用得到迅速发展。迄今为止，β-内酰胺类抗生素已由单纯生物来源发展为经半合成及全合成制备；其抗菌活性由仅对革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌有效，发展至广谱和超广谱抗菌，还出现了抗菌作用以外的生物活性。

Cefroxadine Hydrate是一类新的头孢类化合物，为Cefroxadine（如化学结构式II所示）的二水合物，Cefroxadine Hydrate的化学命名为：(6R,7R)-7-[[(2R)-2-氨基-2-(1,4-环己二烯)乙酰基]氨基]-3-甲氧基-8-羰基-5-硫杂-1-氮杂二环[4.2.0]-2-辛烯-2-羧酸二水合物。其化学结构式如结构式VIII所示。

II

VIII

Cefroxadine作为一种口服的头孢菌素类抗生素，对革兰氏阳性和阴性菌有广谱抗菌作用，其抗菌谱与头孢克洛相似。其抗菌活性强于头孢氨苄。临床上用于呼吸道、泌尿系统、皮肤和软组织、生殖系统（包括前列腺）等部位的感染，也常用于中耳炎。本品口服吸收良好，血清为1小时，12小时内大部分从尿排泄。在作为一种儿童用药中体现出巨大的优势。而且对高度危险性糖尿病病人无不良影响。

日本专利JP1991148282和美国专利US4073902均报道了该化合物的合成方法，但是所得产物很难是纯度足以符合日本药局方（第十五改正版）制药标准的单一化合物，在大多数情况下，会存在由于合成工艺所带来的杂质，在把包含在产物混合物中的Cefroxadine变成活性药物成分（“API”）的加工期间的某些阶段，必须分析Cefroxadine的纯度，通常通过HPLC或者GC分析，以确定是否适合连续加工或最终用于药品。Cefroxadine不需要是绝对纯的，绝对纯度是难以达到的理论上的理想。相反地，纯度标准意在确保API不会由于杂质的存在而降低临床使用的安全性。

通常，利用光谱方法和通过其他物理方法识别次要产物、副产物和附加试剂（总称为“杂质”），于是杂质与色谱中的峰位置（或薄层色谱板上的斑点）有关。此后，杂质可以通过其在所述色谱中的位置被识别出来，色谱中的位置通常用样品注射到柱上和特定的组分经检测器流出之间的时间以分钟计算，被称为“保留时间”。这一时间段基于使用仪器的条件和许多其他因素每天变化。为减轻这样变化对杂质准确鉴别的影响，专业人员使用“相对保留时间”（“RRT”）来鉴别杂质。杂质的RRT是其保留时间除以一些参考标记物的保留时间。理论上，Cefroxadine本身能被用作参考标记物，但实际上Cefroxadine在混合物中占有压倒性比例，使其趋向于饱和柱子，导致不能再现保留时间，即相对于Cefroxadine的峰最大值趋向漂移。因此，往往希望选择一种替代化合物，将其以足以可检测但不会饱和柱子的足够低的量加入或存在于所述混合物中，并且将化合物作为参考标记物使用。

药物生产的研究人员和开发者知道，相对纯状态的化合物能被用作“参考标准品”（“参考标记物”类似于参考标准品，但它用来做定性分析）以确定化合物在未知混合物中的数量。当所述化合物用作“外标物”时，以与未知混合物相同的技术来分析所述化合物的已知浓度的溶液。所述化合物在混合物中的数量可以通过比较检测器响应值的大小来确定。

如果已经预先确定出弥补检测器对两种化合物灵敏度差别的“相应因子”，那么所述参照标准品化合物也可以用于确定混合物中另一化合物的数量。为此目的，可以将所述参照标准品化合物直接加入到混合物，而在这样情况下它被称作“内标物”。

通过使用称作“标准品添加”技术，其中至少两种样品是通过加入已知的和不同量的内标物制备的，使未知混合物包含一些参照标准品化合物时，所述参照标准品化合物甚至可以作为内标物。最初在混合物中的参照标准品化合物对应的检测器响应值的比例，可以通过将检测器响应值对加入到各个样品中的参照标准品化合物的量所作的图外推至零来确定。

发明内容